通用步骤加血0清封闭液1.去掉片子上多余缓冲液。2.取适量血0清封闭液完全覆盖切片。3.在湿盒中室温孵育15min。4.浸入洗涤缓冲液中5min。加一抗1.去掉切片上的多余洗涤缓冲液。2.将稀释的一抗加到切片上，完全覆盖***细胞。3.在湿盒中室温孵育30min。4.用洗涤缓冲液洗去一抗，在洗液中润洗5min。注：如果显色速度过快，建议进一步稀释一抗，将一抗稀释度以1/50、1/100、1/200、1/400和1/800，***佳稀释度的选择是显色10min后阳性显色效果满意而没有背景显色。产品说明本产品是基于鲁米诺底物的化学发光***盒，能够被辣根过氧化物酶（HRP）催化，发出强烈辉光，检测灵敏度达到pg级。本***盒优化了底物组成，使用了新型高0效增强剂，发光强度比传统ECL显色液提高了30-100倍，并有效地降低了背景。***盒使用新的氧化剂代替不稳定的HO，HybriMore，提高了***盒的稳定性，室温可稳定放置1年。工作液被HRP催化后，发出特定波长荧光（400-450nm），可对X0光胶片***，也可直接使用荧光CCD扫描，主要应用于Western检测以及化学发光免0疫检测系统。过度染色1.没有有效封闭内源性过氧化物酶。2.不完全脱蜡。3.过度***粘附。4.一抗稀释度不当。5.蛋白质非特异性结合。不染色1.忘记加一抗、生物素化二抗或亲合素-HRP。2.处理过程中抗原***。3.固定不当。4.用含叠氮钠洗涤液。5.操作过程中样品彻0底干燥。6.未按操作程序操作。染色较弱1.加免0疫***前没有将洗涤液去掉。2.抗0体稀释不当。3.显色前底物放置时间过长。4.过氧0化氢的***作用。HybriMore-博特龙(推荐商家)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司位于江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前博特龙在生物制品中享有良好的声誉。博特龙取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。博特龙全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)