综上所述，新的改良的小鼠免0疫方法具有很好实验效果。孕妇血0清AFP水平的变化与唐氏综合征有密切关系。目前孕中期人绒毛膜促性腺激0素(HCG)联合AFP筛查唐氏综合征胎儿已成为欧美亚许多国家常规服务项目之一，在假阳性率为5％左右情况下，这种筛查方案对唐氏综合征的检出率可以达65％～75％[9-11|。因而免0疫方法测定血0清中AFP浓度已在临床得到广泛应用。羊水和母体血0清中AFP浓度的升高，对胎儿神经管缺陷和其他遗传缺陷的产前诊断，也具有应用价值。在大多数原发性肝细胞癌和内胚窦癌患者血0清中AFP浓度升高，检测AFP有助于肿0瘤的早期诊断，也是在治0疗过程中观察疗0效的一项指标。采用本实验新改进的方法制备AFP—McAb，脂质体转染试剂，对胚胎发育、癌变过程中基因表达、AFP的纯化、肝0癌的导向治0疗以及提供诊断0试剂等都有重要的实际应用意义。【摘要】目的建立一种快速制备甲胎蛋白单克0隆抗0体(AFP—McAb)杂交瘤细胞系的方法。方法以常规和改良两种方式同时免0疫8～12周Balb／c小鼠，取小鼠脾细胞与骨0髓瘤细胞SP2／0融合并行次黄piao呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养。用间接酶链免0疫吸附试验法(EI。ISA)筛选阳性克0隆株，并建立细胞系。结果在较短时间内，改良法能获得高0效价的免0疫抗0体，与常规免0疫法相比有极显著差异(P<0．001)，同时改良法的细胞融合率和抗0体阳性率也显著高于常规免0疫法(P<o．001)。筛选获得的高0效分泌抗人AFP—McAb的阳性杂交瘤细胞珠进行了初步鉴定。结论新的改良方法优化了常规的McAb制备中动物免0疫程序，并能成功筛选出AFP—McAb杂交瘤细胞系。动物免0疫使用quickantibody作为免0疫佐剂，对小鼠腿部肌肉免0疫，MRJ重组蛋白(1μg/mL)与免0疫佐剂各200μL混匀免0疫6-8周龄BALB/c小鼠4只，每只100μL。初次免0疫后第21天同样的方法进行第二次免0疫，第35天尾静脉取少量血做效价检测，间接ELISA检测效价滴度高于1∶8000则进行冲击免0疫，冲击免0疫直接以不加佐剂的MRJ蛋白对小鼠冲击免0疫一次，每只20μg。冲击免0疫后96h内取脾0脏细胞做细胞融合。脂质体转染试剂-苏州博特龙公司由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司是一家从事“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”的公司。自成立以来，我们坚持以“诚信为本，稳健经营”的方针，勇于参与市场的良性竞争，使“博奥龙/BiodragonAbBox”品牌拥有良好口碑。我们坚持“服务至上，用户至上”的原则，使博特龙在生物制品中赢得了客户的信任，树立了良好的企业形象。特别说明：本信息的图片和资料仅供参考，欢迎联系我们索取准确的资料，谢谢！)