siRNA转染***-苏州博特龙公司(在线咨询)
以高分子聚合物为载体的***传递技术正成为人们研究的方向。但应用的阳离子聚合物转染***,仍然存在转染效率不高和细胞毒性的问题。***新的高分子聚合物转染***是纳米聚合物转染***,由于采用新技术和新材料,具有高0效、安全、低细胞毒性。其原理是:分子内含有许多氨基,在生理PH下会发生质子化,这些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面的负电荷,使DNA分子由伸展结构压缩为体积相对较小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。转染复合物主要是通过细胞内吞作用将DNA转移进入细胞,形成内含体(endosome),DNA从内含体释放,进入细胞质中,再进一步进入核内转录、表达。通过纳米技术生产出的转染***在纳米尺度表现出结合保护DNA能力强、毒性低的独0特性能。注意事项:1.质粒DNA:请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒DNA。2.稀释液:0.85%(W/V)生理盐水,用低内毒0素纯水配制,siRNA转染***,高压消毒或除0菌过滤。3.培养基:经过DMEM、RPMI-1640和M199等常规培养基测试,推荐使用含5~10%牛血0清的DMEM,若转染效果不理想可尝试其它培养基。4.以24孔细胞板转染实验为例,推荐每孔低内毒0素质粒DNA用量为2μg、转染***用量为3~5μl,请在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告***进行优化。5.如果实验目的在于筛选抗药性稳定细胞系,可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染,从而可节省18~24小时的转染前细胞培养时间。转染***简介:其中病毒载体的特点是整和效0率高,可使外源***在宿主细胞中长期表达,缺点是存在潜在的安全***性。电穿孔法及显微注0射法的特点是转染率较高,缺点是需要昂贵的仪器,前者对细胞的损伤较大,后者在导入DNA时需要一个细胞一个细胞地注0射,不适合大量细胞研究的需要。人们一直在寻找更有效、毒性小同时对研究影响也小的转染***。由于脂质类转染***对细胞的毒性是由其脂质特性决定的,众多的研究者和生物公司将新一代转染***的开发聚焦在非脂质体的聚合物上,并已有一些优0秀的***产品上市。siRNA转染***-苏州博特龙公司(在线咨询)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司是从事“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”的企业,公司秉承“诚信经营,用心服务”的理念,为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询!联系人:刘总。)