反相色谱中样品的保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定，保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大．对于非极性化合物通常遵循以下规则：(弱)非键合硅胶《基<C1(TMS)<C3<***<<C8≈C18(强)。溶质保留值与固定相表面积成正比，普通载体(80A°)的比表面积约为250m2/g，而300A°孔径载体的比表面积约为60m2/g。当其他条件相同时，溶质在300A°孔径(低表面积)色谱柱上的保留值大约为80A°孔径色谱柱上保留值的1/4(60：250)，小孔隙柱如高保留的C18柱或石墨柱有利于强亲水性样品洗脱。样品的保留值也可以通过改变流动相组成或溶剂强度来调整，溶剂强度取决于的性质和其在流动相中的浓度。在反相色谱中，采用高溶剂强度、低极性的流动相时可获得较低的保留值。固定相的不同也可以导致选择性发生变化，基柱、柱、C8柱、C18柱等的选择性有很大差异，一般应优先考虑C8柱、C18柱，然后是基柱，再次是柱。据统计，近80%的有机物及无机物可以用液相色谱法进行分离．其中反相色谱中的C18柱是液相色谱中为常用的一类色谱柱。液相色谱仪在使用过程中难免会接触到腐蚀性的物质。这些腐蚀性物质不论是气体、液体还是固体，都有可能损坏仪器的材料和零部件，降低色谱仪的使用寿命。在使用时要尽量避免这种情况的出现。液相色谱仪流动相类型有多种，流动相性质对样品的分离影响很大。液相色谱仪流动相类型：1、按组成可分：单组分流动相和多组分流动相。2、按极性可分：极性流动相、弱极性流动相和非极性流动相。3、按作用可分：底剂和洗脱剂。4、按使用方式可分：等度流动相和梯度流动相。5、按用途可分：己烷、乙1酸乙1酯、乙醇、乙1腈和水等。采用二元或多元组合溶剂作为流动相，可以灵活调节流动相的极性和增加选择性，改进分离和调整出峰时间。液相色谱仪的原理：分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关，也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中，K有不同的概念：吸附色谱法为吸附系数，离子交换色谱法为选择性系数（或称交换系数），凝胶色谱法为渗透参数。但一般情况可用分配系数来表示。在条件（流动相、固定相、温度和压力等）一定，样品浓度很低时（Cs、Cm很小）时，K只取决于组分的性质，而与浓度无关。这只是理想状态下的色谱条件，在这种条件下，得到的色谱峰为正常峰；在许多情况下，随着浓度的增大，分离纯化，K减小，这时色谱峰为拖尾峰；而有时随着溶质浓度增大，K也增大，这时色谱峰为前延峰。因此，只有尽可能减少进样量，使组分在柱内浓度降低，K恒定时，才能获得正常峰。赛尔夫科技公司-江西分离纯化由武汉赛尔夫科技有限公司提供。武汉赛尔夫科技有限公司位于湖北省武汉市东湖新技术开发区流芳大道52号。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前赛尔夫在其它中享有良好的声誉。赛尔夫取得商盟认证，我们的服务和管理水平也达到了一个新的高度。赛尔夫全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)