PCR实验室建设来电咨询,东胜科星
作者:山西东胜科星2020/10/5 22:02:52






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在前PCR区建立PCR混合物:

⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分装并保存在-20℃或4℃,在实验室只涉及到扩增一种或少数几种特异序列时这样做很有用。

⑵如果你的实验室使用多套引物,以致于配制包括所有***的单一反应混合物不够经济,可以考虑分装保存够一天的PCR成分。

⑶作为一个规则,应该保存一套阴性、弱阳性和强阳性对照样品来分析样品配制和PCR前过程的效率和洁净程度。而且,你也希望通过使用一个已知的弱阳性样品来验证你的样品缓冲液以证明里面不含扩增***物。

⑷阴性样品要与每组样品同时做,以分析是否存在样品与样品之间的污染以及是否存在PCR产物的污染,阴性对照应该包括核酸以外的所有***。

⑸当做阳性对照时,有两个理由决定了应该使用很少数量的核酸。

⑹由于必须有对照反应,对照模板的特点应该予以考虑。





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净化实验室除了解决空气净化的问题以外,还要尽可能多的为实验工作提供方便,因此在设计上应考虑一些必备的实验室用器具。

1、互锁式传递窗:在P2实验室配有两个传递窗。保证了实验室物流的安全性。互锁式传递窗内有紫外线灯,当污染过物品拿出实验室前进行消毒.互锁式传递窗还保证了室外和室内空气的隔绝,方便了实验人员的物品传递,减少了实验人员进出实验室的次数.传递窗室内室外都可控制。

2、自动闭门器:根据***规范要求,在洁净实验室门上安装有自动闭门器。







PCR实验室污染的预防与控制

PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然***组DNA的污染;***的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染,实验就必须停止,直到找到污染源为止,而且实验结果必须作废,需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐,浪费人力物力。因此要避免污染,首先应是预防,而不是排除。






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PCR实验室完备的实验室配套设施

完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件,应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器,如超净工作台、离心机、加样器等。

PCR扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域:***贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免交叉污染,进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行,即只能从***贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。






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