大肠菌群检验方法

国家标准采用三步法，colitag检测试剂，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。　　乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。

　　分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，大肠检测试剂，观察菌落形态。

　　证实试验：挑取平板上的ke疑菌落，大肠菌群检测试剂，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。

　　报告：根据证实为大肠杆菌阳性的管数，查MPN表，报告每100ml（g）大肠菌群的MPN值。

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为检验饮用水是否达到卫生标准，需要进行水中的细菌数量及大肠菌群数的测定。细菌总数可以说明水质被污染的程度，一般来说，细菌数量越多，污染的程度越高。大肠菌群是大量出现在粪便中的非致病菌，从其数量的多少可判断水源被人畜排泄物污染的程度，所以大肠杆菌可作为粪便污染的指示菌。

酶底物法 （ enzyme substrate technique）的原理是 :利用大肠菌群细菌能产生β2半乳糖苷酶 （β2D2galactosidase）分解 ON 2PG （O rtho2 nitrophenyl2β2D2galactopyranoside ） 使培养液呈黄色 ，检测水样中是否含有大肠菌群。利用大肠埃希菌产生 β2葡萄 糖 醛 酸 酶 （ β2glucuronidase ） 分 解 MUG （ 42 methyl2umbelliferyl2β2D2glucuronide）使培养液在波长 366 nm紫外光下产生蓝色荧光 ，河南检测试剂， 检测水样中是否含有大肠埃希菌。酶底物法有商品化试剂供应 ，实验操作简便 ，无需确认试验 ，可同时检测水样中大肠菌群和大肠埃希菌。如果改变培养温度 ，还可检测耐热大肠菌群。该方法检测周期短 ， 18 ～24 h 即可报告结果。可见该方法较大的特点是节省了时间和人力。

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