大肠菌群检验方法
***标准采用三步法,即:乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。 乳糖发酵试验:样品稀释后,选择三个稀释度,每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h,观察是否产气。
分离培养:将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上,36±1℃培养18-24h,观察菌落形态。
证实试验:挑取平板上的ke疑菌落,进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h,观察产气情况。
报告:根据证实为大肠***阳性的管数,查MPN表,报告每100ml(g)大肠菌群的MPN值。
水质大肠菌群酶底物法检测系统原理
一、检测用途:酶底物法测定用途:用于检测水中总大肠菌群粪大肠菌群(耐热大肠菌群)和大肠埃希氏菌。可用于检测水的类型:饮用水、水源水、废水、食品水、地表水、地下水、海水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、畜牧用水、yi疗用水等。二、检测原理:酶底物法采用ONPG 和MUG 两种营养指示剂,这两种***分别可以被大肠菌群的 β-半乳糖苷酶和大肠***的 β-葡糖醛酸酶分解代谢。当大肠菌群在酶底物检测***中生长时,其使用 β-半乳糖苷酶分解代谢 ONPG,并使样品从无色变为***。大肠***使用 β-葡糖醛酸酶分解代谢MUG 时,能够发出荧光。
酶底物法相比多管发酵法、滤膜法的优势特点?水质大肠菌群酶底物法检测系统:
由程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测***四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水等。
优势特点:
酶底物法为GB5750-2006收录的用于大肠***检测标准方法,酶底物法是目前水中大肠***检测的***方法,目前以其方便快捷,假阳性低,适用大量样品快速检测等优点正逐步被国内检测部门所认可。
程控定量封口机工作原理: 加入含有总大肠菌群***的水样,目标***在Minimal Medium ONPG-MUG培养基中36℃±1℃培养,总大肠菌群***产生的特异性生物酶β一半乳糖苷酶能分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现***;同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的荧光底物MUG,产生特征性荧光。同样原理,耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养基呈现***。
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