大肠菌群检验方法

***标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。　　乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。

　　分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。

　　证实试验：挑取平板上的ke疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。

　　报告：根据证实为大肠***阳性的管数，查MPN表，报告每100ml（g）大肠菌群的MPN值。

大肠***平板计数法检测步骤如下：

1、制备样品稀释液，吸取1mL加入到平板中，倾注55度左右的已灭菌的VRBA琼脂15-20mL，凝固后36度24小时培养，计数紫红色菌落

2、再将合适稀释度的VRBA平板上的紫红色菌落转接10支BGLB，统计阳性率

3、再将计数的VRBA结果X阳性率X稀释度，就是***终结果。

大肠菌群是指在37℃培养24h内能发酵乳糖产酸，产气的兼性厌氧的革蓝氏阴性无芽孢***的总称。主要由肠***科中四个属内的***组成，即埃希氏***属，柠檬酸***属，克雷伯氏菌属和肠***属。

水中大肠菌群的检测方法，常用多管发酵法和滤膜法。多管发酵法可适用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要的时间较长。滤膜法仅适用于自来水和深井水，操作简单、快速，但不适用于杂质较多易于堵塞滤孔的水样。