固定底物技术酶底物法（Defined Substrate Technology）采用大肠菌群***能产生β-半乳糖苷酶（β-D-galactosidase）分解ONPG（Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside）使培养液呈***，以及大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide）使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理，来判断水样中是否含有大肠菌群及大肠埃希氏菌。固定底物技术酶底物法可以选用国标中推荐粉状培养基（西安立科公司的酶底物***）来进行简便的操作；无需确认试验；固定底物技术酶底物法检测时间短，只需24小时即可同时定量出水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌的MPN值。

程控定量封口机工作原理： 加入含有总大肠菌群***的水样，目标***在Minimal Medium ONPG-MUG培养基中36℃±1℃培养，总大肠菌群***产生的特异性生物酶β一半乳糖苷酶能分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现***；同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的荧光底物MUG，产生特征性荧光。同样原理，耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG，使培养基呈现***。

目前水中粪大肠***群（耐热大肠菌群)检测方法主要有传统的滤膜法及多苷发酵法，并且已经列入环保行业标准方法(Hyr347-2007),此两种传统方法被国内环境监测部门广泛采用，但该方法操作时间久、步骤较为繁琐，并且需验证试验，不能对yi疗废水的污染状况做出快速评价，及时性较差,制约了环保部门的监督监测的即时效果和环境应急措施的制定。因此研究并选择一个快速、准确的监测水中粪大肠***群（耐热大肠菌群)的标准方法就具有相当重大的意义。