水中粪大肠菌群的常见检测方法

1、纸片法

采用纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过粪大肠菌群在上面的生长、显色来测定的方法，即粪大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落，菌落周围产生黄圈是粪大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。

2、酶底物法

将加入酶底物检测***的100ml水样注入51孔或97孔的定量测量盘中进行密封后培养，由于大肠菌群***能产生一种β-半乳糖苷酶分解PG使得培养液呈***，同时大肠埃希氏菌可以产生葡萄糖醛酸酶分解MUG，培养液将会在波长366nm紫外光下产生荧光反应。通过计算有***反应和荧光反应的孔穴数，可对照MPN表查出其代表的粪大肠菌群可能数水中粪大肠菌群。

水中粪大肠菌群的常见检测方法

1、聚合酶链式技术

提取粪大肠菌群混悬液和待测水样的DNA，利用PCR技术扩增编码约260bp的LacZ***（β-半乳糖苷酶***）和约150BP的UdiA***（β-D-半乳糖苷酶***）的DNA，分别检测大肠菌群数和大肠***。

2、荧光原位杂交技术

由于粪大肠菌群特异的DNA序列，借助荧光标记的特异寡聚核苷酸片段作为的探针与待测水样中的DNA分子杂交，将杂交细胞经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量分析，确定菌群数。

酶底物法封膜机安装校准

①开启纸板箱，有包装，以便后再用。

②把设备放于一个开阔的室内空间，前后要有橡胶垫和定量分析盘进出室内空间。

③把电源线插头插进设备侧面开关电源的插口，随后在插进电源插座，开启全自动封口机按键开关，这时全自动封口机刚开始系统自检升温，大概等候3分钟，显示器显示“SEA”字眼，全自动封口机就进到常规工作情况。

1、根据酶底物法封膜机自动将水样分派到51孔或是97孔定量分析盘孔中封膜成单独的孔。

2、培养24小时结束后，阳性孔数能够转化为MPN值，能够直接读出数值。

3、51孔定量分析盘可监测每100mL水样中1-200MPN值。

4、97孔定量分析盘可监测每100mL水样中1-2,419MPN值。

5、全部监测流程手工制作时长低于1分钟。