大肠菌群检验方法

***标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。　　乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。

　　分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。

　　证实试验：挑取平板上的ke疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。

　　报告：根据证实为大肠***阳性的管数，查MPN表，报告每100ml（g）大肠菌群的MPN值。

水质pH值的检测用电位法检测水质的pH值时，是以玻璃电极作指示电极，饱和甘gong电极作参比电极，***待测溶液中组成原电池，采用酸度计直接测量此原电池的电动势，在酸度计上直接读出待测水质的pH值，在测量之前要先用pH标准缓冲液来校正仪器上的标度，使指针所指示的标度值恰好为标准溶液的pH值，然后在换上待检测的水质，就能测得其pH值了，不过为了尽量减少误差，大家应选用pH值与待检测水质相近的标准缓冲液，而且在检测的过程中尽量要保持温度的恒定。

总大肠菌群***主要由以下4个菌属***组成：埃希氏菌属、柠檬酸菌属、克雷伯菌属和肠***属。这些菌属可以在人、畜粪便中检出，有的也可以在营养丰富的水体中检出，即非粪便污染的情况下，也有检出这些***的可能性。粪大肠菌群组成与总大肠菌群组成相同，但主要组成是埃希菌属，在此菌属中与人类生活密切相关的仅有一个种，即大肠埃希氏菌；柠檬酸菌属、克雷伯菌属和肠***属所占数量较少。

酶底物法 （ enzyme substrate technique）的原理是 :利用大肠菌群***能产生β2半乳糖苷酶 （β2D2galactosidase）分解 ON 2PG （O rtho2 nitrophenyl2β2D2galactopyranoside ） 使培养液呈*** ,检测水样中是否含有大肠菌群。利用大肠埃希菌产生 β2葡萄 糖 醛 酸 酶 （ β2glucuronidase ） 分 解 MUG （ 42 methyl2umbelliferyl2β2D2glucuronide）使培养液在波长 366 nm紫外光下产生蓝色荧光 , 检测水样中是否含有大肠埃希菌。酶底物法有商品化***供应 ,实验操作简便 ,无需确认试验 ,可同时检测水样中大肠菌群和大肠埃希菌。如果改变培养温度 ,还可检测耐热大肠菌群。该方法检测周期短 , 18 ～24 h 即可报告结果。可见该方法较大的特点是节省了时间和人力。