目前,大肠菌群检测方法发展很快,已提高到分子生物学水平,使检测更快速、准确。酶底物法以其操作简便、检测周期短,将取代多管发酵法、滤膜法等传统方法,尤其是酶底物法采用密封培养技术,在检测***污水时可以减少人员接触而降低检测人员的致病风险,因此具有更强的实用价值和应用价值,正是目前水中粪大肠菌群的快速检测标准方法之一。
水质大肠菌群酶底物法检测系统原理
一、检测用途:酶底物法测定用途:用于检测水中总大肠菌群粪大肠菌群(耐热大肠菌群)和大肠埃希氏菌。可用于检测水的类型:饮用水、水源水、废水、食品水、地表水、地下水、海水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、畜牧用水、yi疗用水等。二、检测原理:酶底物法采用ONPG 和MUG 两种营养指示剂,这两种***分别可以被大肠菌群的 β-半乳糖苷酶和大肠***的 β-葡糖醛酸酶分解代谢。当大肠菌群在酶底物检测***中生长时,其使用 β-半乳糖苷酶分解代谢 ONPG,并使样品从无色变为***。大肠***使用 β-葡糖醛酸酶分解代谢MUG 时,能够发出荧光。
酶底物法 ( enzyme substrate technique)的原理是 :利用大肠菌群***能产生β2半乳糖苷酶 (β2D2galactosidase)分解 ON 2PG (O rtho2 nitrophenyl2β2D2galactopyranoside ) 使培养液呈*** ,检测水样中是否含有大肠菌群。利用大肠埃希菌产生 β2葡萄 糖 醛 酸 酶 ( β2glucuronidase ) 分 解 MUG ( 42 methyl2umbelliferyl2β2D2glucuronide)使培养液在波长 366 nm紫外光下产生蓝色荧光 , 检测水样中是否含有大肠埃希菌。酶底物法有商品化***供应 ,实验操作简便 ,无需确认试验 ,可同时检测水样中大肠菌群和大肠埃希菌。如果改变培养温度 ,还可检测耐热大肠菌群。该方法检测周期短 , 18 ~24 h 即可报告结果。可见该方法较大的特点是节省了时间和人力。
大肠***检测:
气相色谱法主要是将大肠***经过一系列衍生化的前处理后,为接下来的分析研究提供尽可能多的化学组分。大肠***的污染程度可以用顶空气相色谱法来分析,其原理是利用食品密封系统顶部的微生物代谢产物CO2对微生物进行分析。这种方法对食品质量安全检测有重大意义。与上述传统技术相比,此种方法具有检测速度快、灵敏度高的优点。
gao效液相色谱法(HPLC)主要是根据离子配对反相层析的原理来分析核酸。在长链DNA所携带的磷酸基团比较多,因此会有更多的TEAA与之相融合,其在柱内停留的时间增加。因为yi腈具有亲水性,可以通过其而将DNA分离,在具备一定的变性温度下,可以通过图谱显示明显的吸收峰。该技术具有准确度高、灵敏度高、成本低等优点,可大大提高工作效率。
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