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作者:立博泰业2022/9/5 10:27:25






RPA技术的基本原理

RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,反应温度在37°C左右。

重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物***了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换。在这个体系中,由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快,一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。RPA扩增的基础体系(TwistAmp? Basic)含有DNA扩增所需的所有***,我们只要准备好引物和模板就行。扩增结果可以通过凝胶电泳进行终点检测,产物纯化后可用于下游研究。

在这个基础体系中添入不同的酶和探针,就可以实现多样化的RPA应用。举例来说,TwistAmp? exo结合了的exo探针技术和核酸外切酶III,能实现数据的实时读取,就像荧光定量PCR一样。不过反应终点的扩增子总量有所减少,适合获得强荧光信号进行动力学分析,不适合终点检测(比如跑胶)。将exo探针技术、核酸外切酶III和逆转录酶结合起来,可以一步实现RNA模板的实时扩增。




RPA

RPA 便携、等温,可替代 PCR ,非常适合用于分子检测***、动物、食品安全、生物防御和农业中。

速度—— 检测时间 15 分钟以内;

敏感度—— 单分子检测,不需要  thermocyler ;

简单—— 稳定的冻干***,几乎没有硬件要求的可靠等温技术。

1.TwistAmp Basic  ***盒( 96 次)

2.TwistAmp exo  ***盒( 96 次)

3.TwistAmp nfo  ***盒( 96 次)

4.Milenia Hybridtech 1 侧向流***条

5.Milenia Hybridtech 2 侧向流***条









TwistDx恒温扩增应用

TwistDx公司开发的重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。

RPA反应的适宜温度在37℃~42℃之间,无需变性,常温下即可反应,大大加快了PCR的速度。并且由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。RPA检测的灵敏度很高,能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可检出水平,从单个模板分子得到大约1012扩增产物。无需复杂样品处理,即可实地检测;既可扩增DNA也可扩增RNA,省去额外的cDNA合成步骤;检测方式多样:终点检测、对扩增过程进行实时监控或通过侧流层析试纸条(LFD)读取结果。

***盒包括两类:①.TwistAmp冻干研发***盒(包括TwistAmp Basic***盒、TwistAmp exo ***盒和TwistAmp nfo ***盒共三种);②. TwistAmp液态研发***盒(包括TwistAmp Liquid Basic ***盒和TwistAmp Liquid exo ***盒共两种)

立博泰业拥有***的技术,我们都以质量为本,信誉高,我们竭诚欢迎广大的顾客来公司洽谈业务。如果您对TwistDx***盒感兴趣,欢迎点击左右两侧的在线***,或拨打咨询电话。



RPA技术


01  特别快,传统PCR要45分钟,因为要反复升温降温。RPA由于是恒温,所以只需要3-10分钟。

02  灵敏度高,因为是高度定向扩增,所以样品即便有点儿杂质也OK,免除了前处理环节,尽量多的保留了样本。

03  温度控制要求低,一般是加热到40℃,但是在紧急情况下,贴在人身上用***的体温36℃、37℃也没问题。甚至在室温25℃,也是可以运行,就是慢点儿,要等一个小时而已。

04  适用性强,面对RNA病毒,直接在***里加入逆转录酶就好,一锅端。




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