RPA原理
重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物***了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换。在这个体系中,由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快,一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。
TwistDx***盒
常见的是核酸检测***盒。一般多为qpcr方法的,也有多重pcr的。检测新型冠状病毒特异序列的方法常见的是荧光定量PCR(聚合酶链式反应)。因PCR反应模板仅为DNA,因此在进行PCR反应前,应将新型冠状病毒核酸(RNA)逆转录为DNA。在PCR反应体系中,包含一对特异性引物以及一个Taqman探针,该探针为一段特异性寡核苷酸序列,两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;如反应体系存在靶序列,PCR反应时探针与模板结合,DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解,报告基团与淬灭基团分离,发出荧光。每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数(Ct值)与病毒核酸浓度有关,病毒核酸浓度越高, Ct值越小。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值。
TwistDx***盒的相关简介
RPA 于 2006 年由 A*** Scientific Ltd(英国剑桥,由 Wellcome Trust Sanger Institute 创立)的 Niall Armes 推出。虽然RPA在等温核酸扩增技术中还没有占据很大的市场份额(根据Grand View Research报告的数据,图1A),但它正在经历着快速的发展。迄今为止,已经发表了 250 多篇有关 RPA 的出版物,并且在过去六年中 RPA 的文献数量一直在增加;值得注意的是,RPA 文献数量从 2014 年开始呈指数增长。
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