RPA原理
重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物***了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换。在这个体系中,由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快,一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。
恒温扩增技术
应用领域:广泛应用于临床诊断,食品安全检测,动物***检测等领域
技术特点:快速,特异,无需专门设备
类型:取代PCR的恒温核酸扩增技术,目前有应用前景的就是RPA技术,此外也有一些其他恒温扩增技术,主要包括:
1. 滚环核酸扩增( rolling circle amolification,RCA )
2.环介导等温扩增( loop-mediated isothermal amplification,LAMP)
3.链替代扩增
4.依赖核酸序列扩增( nucleicacid sequence based amplification ,NASBA)
5.解链酶扩增( helix dependent amplification, HAD)
TwistDx Liquid***盒
TwistAmp??Liquid***盒提供经甘油稳定化处理的液态RPA***,该形态对于在实验室执行 PCR 和其他基于酶的反应的任何人来说都非常熟悉。这些***各自装于单独的试管中,用户可随意从中移取任何量的酶混合液来构建自己所选的RPA反应体积,配制用于多次反应的预混液,或者以各种 RPA 组分比例进行实验以优化试验。
TwistDx***盒
DNA检测的原理是聚合酶链式反应(PCR)。如果你了病毒,那么应该能检测到病毒的核酸,我们可以利用体外DNA扩增的方式扩增这些核酸并检测。PCR就是一种体外DNA扩增的技术,简单来说就是可以让特定的DNA分子一条链变两条链,两条变四条,四条变八条,每个循环翻一倍。然后通过看经过多少个循环这个DNA分子的数量超过阈值,就可以计算原本样品中DNA的量(也就是说每少一个循环超过阈值说明病毒核酸的量多一倍)。一个30循环的PCR反应大概需要两小时。算上样品处理等时间应该会在四到五个小时左右,如果要等其他人一起做则更久。
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