TwistDx***盒
2018年,TwistDx推出了一系列全新的液态重组酶聚合酶扩增 (RPA)***盒,这些***盒非常适合需要不使用热循环仪就能在15分钟内完成 DNA/RNA 扩增的实验室以及想要灵活构建试验体系的研究人员使用。
TwistAmp??Liquid***盒提供经甘油稳定化处理的液态RPA***,该形态对于在实验室执行 PCR 和其他基于酶的反应的任何人来说都非常熟悉。这些***各自装于单独的试管中,用户可随意从中移取任何量的酶混合液来构建自己所选的RPA反应体积,配制用于多次反应的预混液,或者以各种 RPA 组分比例进行实验以优化试验。
除了具有室温稳定性的冻干态TwistAmp? RPA***盒这一旗舰产品,本次新推出的?TwistAmp? Liquid***盒是现场试验开发的理想之选。液体形态让实验室更容易地在日常工作中使用快速简单的RPA法(该方法有时甚至采用与PCR相同的引物)取代 PCR法,以及更容易地开发出定制的试验。
如何提高扩增曲线的可重复性?
A 优化扩增曲线考虑以下因素: 对于低拷贝数模板,不稳定扩增可能是因为达到检测限或者是反应混匀程度不同(未混匀的反应扩增效率不佳)。另外,在低温情况下存贮,重组酶和辅助蛋白在50%甘油情况下形成沉淀,也是可能导致不稳定扩增的原因。所以,20x主要反应mix在室温下解冻并震荡涡旋将使其成为液体,不影响其功能,并且有效提高扩增效率。不稳定扩增也可能是因为master mix量不足,在加入体系前,用户必须保证震荡后20x主要反应组分均一。
TwistDx
TwistDx Inc. 由分子生物学家兼蛋白生***学家 Niall Armes 博士以及 Derek Stemple 博士和 Nagesh Mahanthappa 博士于 1999 年共同创立,其总部位于英国马萨诸塞州剑桥市。TwistDx Limited 于 2002 年成立,其运营设施位于英国剑桥。
我们的愿景:TwistDx 希望将 RPA 分子检验和技术普及到所有可应用领域,使科学家和技术开发人员不再受到高温 DNA 扩增技术的束缚。
重组酶介导等温核酸扩增技术原理
RAA技术 是重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombinase Aided Amplification)的简称,是一种利用重组酶、单链结合蛋白、DNA聚合酶在等温条件下(佳温度37℃)进行核酸扩增的技术。具体原理为:重组酶、单链结合蛋白、引物形成复合体扫描双链DNA,在与引物同源的序列处使双链DNA解旋,单链结合蛋白(SSB)防止单链DNA复性,在能量和dNTP存在的情况下,由DNA聚合酶完成链的延伸,5-20分钟就可实现仪器扩增。
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