恒温扩增***盒产品特点

产品特点:

1.高特异性,由于同时使用4-6条特异引物,所以特异性比RT-PCR更高。

2.高扩增效率,扩增效率可达到10E9-10E10,比PCR灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的RNA分子

3. 65℃左右完成RT和LAMP扩增,不需要贵重的热循环仪。

4. 即开即用,包含了除引物和模板RNA外的所有成份,十分方便。

5. 肉眼检测扩增结果,不需要昂贵的电泳、荧光PCR等仪器。

6. 提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。

科普｜恒温扩增***盒常用酶原料

NEAR相关酶

切口酶扩增反应(Nicking Enzyme Amplification Reaction, NEAR)是一种基于切刻内切酶切割特性的恒温扩增方法，详细原理可参考啥黑科技可10分钟完成核酸分子检测？。其使用的酶有两种：切刻内切酶：如Nt.BstNBI切刻内切酶，该类酶不同于常规限制性内切酶，其识别特定序列后仅在DNA其中一条链上切割形成缺口，并暴露出游离的3’端；DNA聚合酶：如Vent (exo-) DNA聚合酶或Bst DNA聚合酶，用于DNA链合成，同时具有链置换功能。

恒温扩增***盒操作步骤

提前30分钟将***盒所需组分取出,室温融化。鹿荡混匀。

1).每个干粉反应管加入29.4 uL Abuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产“生影响) ; 1.每个干粉反应管加入29.4 uLAbuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产生影响) ;

2.每个反应管分别加入2 uL上游引物、2 uL下游引物和0.6 μ探针(引物和探针浓度为10 μM ,对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中) 

恒温扩增***盒设计及储存

荧光探针设计:

在上下游引物中间,设计- -段长度为46-52nt与目的片段互补的序列作为荧光探针;

探针序列不与特异性引物识别位点重叠,长度为46-52 nt ,序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。

***盒储存:

运输条件:低温运输;

储存条件:储存温度≤-20°C ,避光保存,避免重压、反复冻融:

产品有效期: 12个月。