核酸释放剂使用方法

1．将约2μL液体样品（如全血、细胞培养液、病毒样品、粪便样品）或2mg（约半粒芝麻大小）的固体样品（如动物***、植物叶片、种子等）加入到50μL本产品中。

注意：样品加入量可能需要根据其DNA的含量稍做调节，如果样品DNA含量少，则用量要增加，但总液体样品用量尽量不要超过本产品用量的1/10；固体样品用量尽量不要超过1mg/10μL的比例。

2．对液体样品，室温放置3分钟；对固定样品80℃加热5分钟；对难以的样品（如有厚壁的***、石蜡***切片、血斑），则保温时间可以延长到10-30分钟。

3．简短振荡混匀后取样品裂解液直接进行PCR扩增或其他扩增（裂解物体积尽量不要超过反应体积的2/5，对50μL体系的扩增，加入的裂解液尽量不要超过20μL。由于各扩增体系成分不同，头次跟本产品组合时尽量做梯度测试，即在50μL的扩增反应中分别加5μL、10μL、15μL、20μL、25μL样品裂解液进行测试）。

4．其余同常规操作。

核酸释放剂

核酸释放剂可以裂解细胞或病毒蛋白质外壳,将其中的核酸释放出来,再通过PCR实验进行核酸检测。它有不同的类型，其中灭活型病毒保存液是新冠检测中应，用普遍的一种核酸释放剂。

有些地方做核酸检测比较多，也直接把这种灭活型病毒保存液称为核酸释放剂，它根本的特点是能快速灭活病毒,将病毒蛋白膜衣壳降解掉,同时将病毒核酸(新冠是RNA)释放出来,这样可以进行逆转录后PCR扩增实验，达到利用核酸检测病毒的目的。

核酸释放剂的优势

优势1 :序列资源丰富, 除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译, 从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。

优势2 :该系列***盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌类资源，每一 种检测***盒 均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证

及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。

核酸释放剂的组成及***配制

1、 酶标板:-块( 96孔)

2、标准品(冻干品) : 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml , 盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后

做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释) , 分别配制成200 U/L, 100 U/L , 50U/L, 25U/L, 12.5U/L, 6.25U/L, 3.12 U/L ,样品稀释液直接作为空白孔0

U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml ( 不要少于0.3ml ) 200 U/L的上述标准品加入含有03ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、样品稀释液: 1x20ml。

4、检测稀释液A: 1x10ml。

5.检测稀释液B .1x10ml.