试纸条操作步骤
1.根据检测样品数量取出相应数量的胶体金检测卡,并在胶体金检测卡.上做好标记。每根胶体金检测卡只能用于单次、单个样品的检测。
2.PCR或RPA扩增后,用带滤芯的吸头取适量扩增产物到新的PCR管中,用稀释液(Tris-HCL 0.05M , pH8.0或者PBS 0.01M , pH7.4)或纯水稀释
2-10倍,根据实际情况选择合适缓冲液,摸索较佳稀释倍数,吹打混匀后进行检测。
3.吸取100uL稀释的扩增产物滴加在胶体金检测卡点样孔中。
4.根据试纸条显色的情况直接读取检测结果,质控线( C线)显色后3-10min内观察结果。
5.记录检测结果,将试纸条密封丢弃在安全处。
试纸条的注意事项及安全提示
1.本产品仅供科研使用。使用前请仔细阅读说明书,严格按照说明书操作。违反或者未按说明书进行操作可能导致错误结果。
2.产品应依照说明书要求,储存于合适的环境和温度下,并在有效期内使用。储存不当或产品过期可能导致错误结果。打开包装后请尽快使用试纸条,以免因试纸条受潮影响试验结果。检测环境光线不足,操作者色弱等因素均可能能导致错误结果。
3.使用完毕后,应尽快将纸条装进密封袋,妥善处理。本产品为- -次性使用产品,请勿重复使用。
试纸条原理
CRISPR 用探针一端标记生物素,另外一端同时标记 FAM 和 TAMRA 作为 Report1; 一端标记生物素,另外一端同时标记 FAM 和 DIG 作为 Report2。当样品中探针被切开 后,生物素端及未被切开的完整探针会通过 SA(链亲和素)磁珠吸附去除,处理后上 清只留下探针的双标记物端即 FAM-TAMRA 和 FAM-DIG,通过试纸条即可检测出对应 被切断的探针,切断探针含量越高,胶体金颜色越深。
试纸条检测结果解读
1.阳性:检测线(T)出现有色条带。阳性结果表明样本中含有待检测的核酸片段,且其数量不小于***条的很低检出限。
2.阴性:检测线(T)无条带。阴性结果表明样本中不含有待检测的核酸片段,或其数量小于***条的很低检出限。
3.质控线(C)出现有色条带,表明SA(链亲和素)磁珠没有充分吸附样品中的完整探针,阳性结果会出现假阳性。在此种情况下,请重新处理样品,增大这个SA磁珠体积或降低样品浓度。
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