核酸释放剂
核酸释放剂可以裂解细胞或病毒蛋白质外壳,将其中的核酸释放出来,再通过PCR实验进行核酸检测。它有不同的类型,其中灭活型病毒保存液是新冠检测中应,用普遍的一种核酸释放剂。
有些地方做核酸检测比较多,也直接把这种灭活型病毒保存液称为核酸释放剂,它根本的特点是能快速灭活病毒,将病毒蛋白膜衣壳降解掉,同时将病毒核酸(新冠是RNA)释放出来,这样可以进行逆转录后PCR扩增实验,达到利用核酸检测病毒的目的。
核酸释放剂如何裂解灭活病毒
裂解病毒的方式有很多种:
1.加热法:通常需要加热80到100摄氏度加热5-10分钟,操作很简单,只用一步即可以得到用于核酸PCR扩增的模板,不需要任何离心、抽提等操作步
骤,比常用的CheleX100提取方法和/方法快。这种方法虽然简单快速,但是提取的核酸含量较少。
2.浓盐法:高浓度的盐可以破坏核酸与蛋白质之间的次级键,使核蛋白解联,使病毒核酸释放出来。通常使用盐酸胍、异硫酸胍或非胍盐裂解盐,
可以直接裂解灭活病毒,不需要加热处理样本,简便快速。
核酸释放剂介绍
核酸释放剂中除了含有裂解的成分外,通常还含有使蛋白变性破坏履结构的去污剂如ss,生物缓冲剂还有防止核酸酶降解核酸的克制剂如EBor,以及维持核酸结构稳定的试剂如aC1等。裂解体系还可能加入蛋白酶, 将蛋白质切成小片段,促进蛋白质与核酸的分离。核酸释放剂或者灭活病毒保存液是德晟的主打的产品之一,此外为了满足不同的捡测需求,还有非灭活型保存液,产品在国内外客户的反馈及工厂供应能力方面都比较理想。
核酸释放剂概述
核酸释放剂于从各种常见的生物样品中快速提取用于核酸扩增的 DNA 样品和 RNA 样品,它具有下列特点:
1. 单溶液,操作简单,只用一步(约 5-10 分钟)即可以得到用于核酸扩增的模板, 不需要任何离心、抽提等操作步骤,比常用的 Chelex100 提取方法和方法快。
2. 即可用于 DNA 模板,又可用于 RNA 模板。
3. 跟各种后续实验兼容,包括 PCR、RT-PCR、LAMP 和 RT-LAMP。
4. 兼容性广,可以用于几乎所有的分子生物学样品,包括细菌、昆虫、真菌、各种 植物、各种动物、法医样品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、 口腔细胞和 FTA 卡)、石蜡组织切片等。
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