恒温扩增***盒产品特点

产品特点:

1.高特异性,由于同时使用4-6条特异引物,所以特异性比RT-PCR更高。

2.高扩增效率,扩增效率可达到10E9-10E10,比PCR灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的RNA分子

3. 65℃左右完成RT和LAMP扩增,不需要贵重的热循环仪。

4. 即开即用,包含了除引物和模板RNA外的所有成份,十分方便。

5. 肉眼检测扩增结果,不需要昂贵的电泳、荧光PCR等仪器。

6. 提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。

恒温扩增***盒原理

本***盒采用恒温荧光检测技术，通过Bst聚合酶及特异性引物在等温条件下对样本中的目的片段进行特异性扩增，结合核酸染料或检测仪器使用，通过反应液颜色的变化或者相关仪器判断结果。

   检测样品类型 人源性、动植物源性的病原体及其他***、***、病毒等的核酸。

   反应条件 反应温度：63℃；

   反应时间：20~60min；

   反应仪器：恒温金属浴/ESETubeScanner/荧光PCR仪/GenieII/浊度仪。

   检测方法 染料法、浊度法、荧光法

科普｜恒温扩增***盒常用酶原料

NEAR相关酶

切口酶扩增反应(Nicking Enzyme Amplification Reaction, NEAR)是一种基于切刻内切酶切割特性的恒温扩增方法，详细原理可参考啥黑科技可10分钟完成核酸分子检测？。其使用的酶有两种：切刻内切酶：如Nt.BstNBI切刻内切酶，该类酶不同于常规限制性内切酶，其识别特定序列后仅在DNA其中一条链上切割形成缺口，并暴露出游离的3’端；DNA聚合酶：如Vent (exo-) DNA聚合酶或Bst DNA聚合酶，用于DNA链合成，同时具有链置换功能。

恒温扩增***盒操作步骤

提前30分钟将***盒所需组分取出,室温融化。鹿荡混匀。

1).每个干粉反应管加入29.4 uL Abuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产“生影响) ; 1.每个干粉反应管加入29.4 uLAbuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产生影响) ;

2.每个反应管分别加入2 uL上游引物、2 uL下游引物和0.6 μ探针(引物和探针浓度为10 μM ,对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中)