慢病毒载体构建在线咨询 苏州博特龙公司
作者:博特龙2022/9/7 18:46:16







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博奥龙公司主要产品有抗0体制0备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。





Western Blot-抗0体检测技术服务?

一、服务内容

1、从动物细胞、人或动物***、***、植物等样品中提取蛋白,重组蛋白、血0清、培养上清等样品

2、对样品中蛋白进行半定量分析

3、Western blot检测

(1) 电泳:聚丙0烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品

(2) 湿法转印(BLOTING:Tank Transfer)

(3) 杂交:用抗0体鉴定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody)

(4) 化学发光检测(ECL),胶片***,TotalLab Quant软件读取IOD值(可选)









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不同亚型的抗0体在结构上有所区别,其免0疫源性与在体内发挥的作用存在差异,对抗0体进行进一步的细分,并进行抗0体亚型鉴定,对于***作用机理的研究、抗0体药0物的开发有重要意义。那么什么是抗0体亚型鉴定?众所周知,亚型指的是相同的构成方式,但是空间结构不同的蛋白质结构。抗0体亚型,指的是在机体内产生的“Y”构型的免0疫球蛋白(Ig),基于小分子多肽结构上的差异,可以进一步的进行细分。相关抗0体亚型鉴定有:IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3,IgM,IgA 的鉴定。






实验步骤:

1、弃去板内液体,洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。再在每个标本的6孔中分别加入6种酶标二抗各100μl,通用阳性、阴性对照的各孔也一样。在加样图上或酶标板上做好标记。贴上封板膜37℃温育30分钟。

2 、吸弃板内液体,洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。每孔分别加入显色剂 A 和显色剂 B 各50μl,换一张新的封板膜贴板避光37℃显色20分钟。

3 、ELISA***盒特异性好一般肉眼即可观察出结果,看显色蓝的那个孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类。更可将反应终止液(每孔50μl)终止反应后用酶0标仪450nm 测长,630nm 参考波长双波长测定结果,参看高值孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类(阳性对照 OD 一般不小于0.8,阴性对照一般不高于0.15,阳性判定标准:样品 OD 大于阴性 OD+0.15,阴性 OD 低于0.05按0.05算)。



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