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作者:博特龙2022/8/9 6:18:11






QuickShuttle 系列转染***是一类具有自主知识产权、独0特配方的阳离子型转染***,具有高0效、低毒和易于使用等优点,推荐用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建。QuickShuttle 区别于常规转染***的两个***主要特点是:

(1)可在贴壁细胞传代尚未贴壁时立即进行转染(立传立转);
(2)转染操作可在一分钟内完成。因此,QuickShuttle 特别适合用于快速大量瞬时转染表达目的蛋白,或大量制备各种病毒载体和假病毒。





1.以 24 孔细胞板转染实验为例,推荐一次(即每孔)转染的低内毒0素质粒 DNA 用量为 1~2μg、转染***用量为 3~5μl(请在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告***进行优化),质粒和转染***可用无菌生理盐水稀释。

2.QuickShuttle 经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试,虽然在实验中推荐使用 DMEM,但有实验结果表明 M199 能够显著增强 QuickShuttle 对 Vero 细胞和 293FT 细胞的转染效果,因此可尝试使用不同培养基对转染条件进行优化。




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磷酸钙沉淀法

磷酸钙沉淀法师基于磷酸钙-DNA复合物将DNA倒入真核细胞的转染方法。磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与ba细胞表面的结合。当核酸以磷酸高-DNA复合物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞的吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内。进入细胞的DNA仅有1%-5%可以进入细胞核中,其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合,在细胞中进行稳定表达,***转导的频率约为10-4,这项技术能用于任何DNA导入哺乳动物细胞进行暂时性的表达或长期的转化研究。



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