腹0水制备产生单克0隆抗0体

0． 5 mL 弗 氏 完 全 佐 剂 腹 腔 注 射 4 只 雌性 BALB / c小鼠，同时培养杂交瘤细胞，弗氏完全 佐剂***七天后，收集状态较好的杂交瘤细胞，洗涤后稀释注入小鼠腹腔，每只小鼠约 1 × 106 个，杂交瘤细胞*** 7-10 天后观察可见小鼠腹部肿大，则可以进行腹0水采集。

果蝇 mrj 的表达情况的检测

分别提取野0生型果蝇 R6 品系和 mrj 的 p 因子插入突变品系 15059 总蛋白，测定蛋白浓度后，上样量为 50 μg 进行 SDS-PAGE 电泳，使用制备的 MRJ 单克0隆抗0体进行 Western Blot 检测。

1.  第21天按同样方式加强免0疫1针。备注：每次佐剂和抗原现配现用。

2.  第35天采微量血进行ELISA测定，抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内，随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。

3.  若抗0体滴度没有达到要求，可在第42天按同样方式加强免0疫1针。备注：通常情况下小鼠只需免0疫2针，而家兔往往需要免0疫3针。

4.  若免0疫3针，可在第52-56天采微量血进行ELISA测定，抗0体滴度应在1:10000-1:1000000范围内，随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。备注：佐剂免0疫效果有时也与抗原特性有关，若免0疫3针后仍达不到要求，不建议进行更多针次免0疫。

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甲胎蛋白(AFP)是一种胎儿特异性糖蛋白，分子量约70，000～72，000道尔顿^，在胚胎肝0脏和卵黄囊中合成，正常人血中含量甚微。1972年有人首0次报道开放性神0经管畸形胎儿、羊水中有高水平的AFP。若胎儿羊水中AFI’值高于均值常见于患无脑儿或脊柱裂的胎儿，亦见于其他多种畸形，如先天0性shen病、食道或肠闭锁、囊0性水瘤、骶尾部畸胎瘤、Rh血型不和、先天愚型、先0天性性腺发育不全等∽J。1983年发现母体血0清AFP水平的降低与唐氏***有密切关系一。。因此制备高0效特异的AFP单克抗0体(McAb)具有重要的意义。