生物素-酪胺信号放大***盒(HRP底物) 酪胺信号放大技术(TSA, Tyramide signal amplification)主要原理是,在过氧0化氢存在情况下,标记在抗0体上的HRP将底物酪胺活化,后者与相邻的蛋白上的酪氨酸残基生成稳定的共价结合,因此这些蛋白(如HRP、抗0体)上会富集大量带有生物素标记的酪胺,使信号被有效放大。生物素为小分子化合物,分子量244。亲和素与生物素有极高的亲和力,结合牢固,而且特异性高,每个亲和素可结合4个生物素。用小分子生物素与HRP酶标记的亲和素发生特异性反应,可减小抗原抗0体反应的空间位阻,使反应明显放大。
注意事项
1. 染液在 Gill 氏苏0木0精 2号配方基础上改良而成,适合于H&E染色和免0疫组化的复染。染色时根据实验室自身条件和实验对象自行摸索***佳染色时间,以上操作方法为初次使用本产品者提供参考。
2. 如果稀释本产品使用,建议使用蒸馏水做 2 倍稀释,并适当延长染色时间,稀释的染液不能长时间保存。
3. 染液可重复使用多次,直到染色效果不满意更换。染液可能由于染色时玻片将过多的液体引入而导致寿命缩短。另外,为防止交叉污染,在染不同的***或细胞片时应该更换染液,用过的染液单独保存,不要倒回原包装。
操作步骤
石蜡切片
1. 脱蜡:二甲0苯,室温,2 次,每次 5~10min。
2. 水合 100%、100%、95%、90%、80%、70%乙醇、蒸馏水,每级 3min。
3. 在洗涤缓冲液中润洗 10min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)
5. 继续通用步骤。
冰冻切片
1. 空气中干燥切片,至少 1hr
2. 用前用合适的固定液固定,如果要延长保存时间,固定后在空气中干燥 1hr。 单独包装在铝箔袋中,–70°C 干燥保存,用前从冰箱取出,室温放置至少 1hr。
3. 浸入洗涤缓冲液中 10~15min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)。
5. 继续通用步骤。
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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。
抗0体稀释液,即用于稀释抗0体的溶液。在抗原抗0体反应的实验中,需用已经制备的抗0体检测样本中的抗原,但抗0体***的浓度很高,需要稀释合适的倍数后才可以用于检测抗原。
脱脂奶粉
脱脂奶粉容易发霉变质,不利于抗0体的回收和保存;国产milk脱脂不充分会增加背景、拮抗抗原抗0体结合,且不能用来做磷酸化蛋白;不能用于稀释二抗。
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