QuickAntibody-Mouse5W (5周标准鼠单抗/多抗制备佐剂)
QuickAntibody-Mouse5W用途
通过5周2针的标准免0疫程序制备小鼠单克0隆和多克0隆抗0体,ELISA滴度(Cutoff值为0.1000)可达到1:10000-1:10000000。
QuickAntibody-Mouse5W使用方法(详见使用说明书)
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度(按每针次50μl用量配制)。
备注:推荐使用的抗原用量为
(1)免0疫原性较强的灭活全病毒或全***以及病毒样颗粒抗原每针次1-5μg;
(2)免0疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg;
(3)偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。
2. 充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1迅速混匀。
备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。
QuickAntibody系列免0疫佐剂有哪些特点?
与常规使用的弗氏佐剂相比,QuickAntibody免0疫佐剂具有免0疫周期短、针次少、无需乳化、抗原用量低、抗0体滴度高、抗0体亲合力高、易获得构象型表位的抗0体等多方面优点,详述如下:
1. QuickAntibody只需两针免0疫,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,与弗氏佐剂相比可减少免0疫针次。
2. QuickAntibody通过减少免0疫针次和降低每针次抗原用量,从而可大大节省总抗原用量。推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-50μg(通常为小鼠5-20μg,
兔子20-50μg);(2)免0疫原性较强的灭活全病毒或全***以及病毒样颗粒抗原每针次1-10μg(通常为小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。
1. 第21天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。
2. 第35天采微量血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。
3. 若抗0体滴度没有达到要求,可在第42天按同样方式加强免0疫1针。备注:通常情况下小鼠只需免0疫2针,而家兔往往需要免0疫3针。
4. 若免0疫3针,可在第52-56天采微量血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:1000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。备注:佐剂免0疫效果有时也与抗原特性有关,若免0疫3针后仍达不到要求,不建议进行更多针次免0疫。
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