Multi-tag多表位标签蛋白
Multi-tag多表位标签蛋白是通过大肠杆0菌表达的已知抗原表位标签的融合蛋白,用于Western Blot阳性对照。融合蛋白中含有***i-tag、Calmodulin-tag、polyglutamate-tag、E-tag、3×FLAG-tag(FLAG-tag包含在其中)、HA-tag、His-Tag、Myc-tag、S-tag、SBP-tag、Softag 1-tag、Softag 3-tag、Strep-tag、TC tag、V5-tag、T7-tag、VSV-tag、Xpress-tag、Isopep-tag、Spy-tag、Snoop-tag、Trx-tag等22种抗原标签序列。纯化后的融合蛋白可与各种蛋白标签抗0体发生特异性反应。
过度染色
1. 没有有效封闭内源性过氧化物酶。
2. 不完全脱蜡。
3. 过度***粘附。
4. 一抗稀释度不当。
5. 蛋白质非特异性结合。
不染色
1. 忘记加一抗、生物素化二抗或亲合素-HRP。
2. 处理过程中抗原***。
3. 固定不当。
4. 用含叠氮钠洗涤液。
5. 操作过程中样品彻0底干燥。
6. 未按操作程序操作。
染色较弱
1. 加免0疫***前没有将洗涤液去掉。
2. 抗0体稀释不当。
3. 显色前底物放置时间过长。
4. 过氧0化氢的***作用。
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抗0体稀释液,即用于稀释抗0体的溶液。在抗原抗0体反应的实验中,需用已经制备的抗0体检测样本中的抗原,但抗0体***的浓度很高,需要稀释合适的倍数后才可以用于检测抗原。
脱脂奶粉
脱脂奶粉容易发霉变质,不利于抗0体的回收和保存;国产milk脱脂不充分会增加背景、拮抗抗原抗0体结合,且不能用来做磷酸化蛋白;不能用于稀释二抗。
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