腹0水制备产生单克0隆抗0体

0． 5 mL 弗 氏 完 全 佐 剂 腹 腔 注 射 4 只 雌性 BALB / c小鼠，同时培养杂交瘤细胞，弗氏完全 佐剂***七天后，收集状态较好的杂交瘤细胞，洗涤后稀释注入小鼠腹腔，每只小鼠约 1 × 106 个，杂交瘤细胞*** 7-10 天后观察可见小鼠腹部肿大，则可以进行腹0水采集。

果蝇 mrj 的表达情况的检测

分别提取野0生型果蝇 R6 品系和 mrj 的 p 因子插入突变品系 15059 总蛋白，测定蛋白浓度后，上样量为 50 μg 进行 SDS-PAGE 电泳，使用制备的 MRJ 单克0隆抗0体进行 Western Blot 检测。

1． 9 腹0水效价的测定

1 mg /mL 的 MRJ 原核表达白每孔 100 μL，包被Elisa 酶标板过夜，以 SP2 /0 细胞培养上清为阴性对照，用间接 Elisa 方法检测腹0水的效价。同时 WesternBlot 检测抗0体使用于 Western Blot 的效价，用 MRJ 重组蛋白做 抗 原 进 行 SDS-PAGE 电 泳，用 制 备 的 MRJ单克0隆 抗0体 作 为 一 抗，设置抗0体稀释浓度 分别为1∶ 500; 1 ∶ 1 000; 1 ∶ 2 000; 1 ∶ 3 000; 1 ∶ 5 000。进 行Western Blot 检测。

1.免0疫：本产品与抗原混合搅拌能很快形成油包水状态，在1:1-1:2情况下都能形成稳定的乳液，1:2乳化较1:1粘稠些，乳化后滴水数周不散；经多品种抗原多种属动物测试免0疫效果极0好，由于乳

化彻0底牢固，因此跟其他佐剂相比比较不容易出现免0疫耐受现象。

2.单抗腹0水制备：将佐剂***BALB/C小鼠腹腔，每只0.3-0.5ml处理腹腔15天左右（一般12-18天），然后***杂交瘤细胞，建议每只***80万-100万个。腹0水会比普通佐剂晚出1.5天-2天，但通

常情况下腹0水的量是普通佐剂出量的1.5-2倍，且单抗腹0水效价不变。

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

通过皮下或肌肉单点***免0疫动物，小鼠每针次100μl，家兔每针次200μl。

（1）佐剂与抗原混合后应尽快***，若放置时间较长出现水油相分层，则必须按上述步骤2重新振荡混匀；

（2）抽入针管前应摇匀，抽入针管后应尽快***；

（3）尽量选择引流淋巴0结附近（如腋窝和腹0股0沟附近）的皮下或肌肉进行免0疫。