细胞冻存步骤
1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。
2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。
3. 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp,5分钟离心收集培养细胞沉淀,彻0底弃去离心管中的上清液。
4. 加入适量的CELLS***ING?细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。
5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管1ml或1.5ml。
6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。
7. 如果想液氮中长期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天时间,方可移至液氮罐中保存。
冻存细胞复苏步骤
1. 从冰箱中取出冻存的细胞,立即放入37℃水浴槽中快速解冻。
2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后,将其中的混合液移至离心管中,1000rmp,5分钟离心收集冻存细胞沉淀,移去上清液(操作时 小心,切勿将细胞沉淀移去)。
3. 加入适量的新鲜细胞培养基,使用移液管缓缓加入到细胞沉淀,轻柔地混匀,将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。
4. 镜检细胞后,可根据各自研究的需要和方法经行细胞常规培养。
无血0清冻存液使用方法:
1、收集悬浮细胞或贴壁细胞,离心去除上清培养液。
2、加入适量的细胞冻存液,重悬细胞,调节密度至1-5x10*↑/mL。
3、将加有冻存液的细胞悬液分装至冻存管中。
4、将冻存管直接转移至-80C水箱中冷冻保存。
5、储存条件:2-8C保存,年有效: -20C保存,两年有效。
无血0清冻存液注意事项:
1、请选择对数生长期细胞进行冻存。
2、冻存液加入细胞后,请尽快放入-80C冰箱冻存。
3、本产品冻存细胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。
4、若需长期冻存细胞,请转移至液氮罐中贮存。
5、冻存液中含DMSO成分,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套。
版权所有©2024 产品网