使用方法:
1. 转染前 18~24 小时接种细胞到 24 孔细胞板中,每孔 5~10×104细胞,1ml 完全培养基。备注:如果筛选抗药性稳定细胞系,可以考虑简化的实验步骤,即在细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染,无需 18~24 小时的等候时间。
2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染***分别稀释到 50μl 生理盐水中。备注:质粒 DNA 和转染***的***适用量需要根据不同培养基来优化,但理论上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范围。
3. 合并上述两溶液并混匀。备注:无需其它转染***所需的 10~30 分钟的等候时间。
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重要提示
1. 与常规转染***不同,使用 QuickShuttle 可在贴壁细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染(立传立转),从而可节省 18~24 小时的转染前细胞培养时间。
2. QuickShuttle 极大简化了转染操作,转染***和质粒混合后无需室温静置孵育,可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染,而且无需在转染后补加血0清或更换培养基,整个转染操作可在一分钟内完成。
3. 立传立转、一分钟完成转染操作和高转染效率等优点使得部分使用 QuickShuttle 的转染实验可在细胞传代后 24 小时内完成,从而比常规转染***节约 24~48 小时。
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