注：对于灵敏度要求不是极高的普通实验室的染胶实验，一般染色10-20分钟（可以将100ng含量以上的蛋白染出条带），低背景，无需脱色，直接观察或者拍照；

对于灵敏度要求极高的染胶实验，一般可采用染色1-2小时（可以将10ng含量蛋白染出条带），低背景，无需脱色，直接观察或者拍照；

一般染色2小时后，蛋***带基本不会再加深，而背景会继续加深，所以一般建议染色不要超过2小时。

一般生物***中都含有一定的内源性过氧化物酶和碱性磷酸酶，在使用辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶检测系统进行免0疫组化染色时，内源性酶也会催化显色底物，产生非特异性着色。因此，在进行免0疫组化染色实验前将***切片内源性的酶消耗掉是必要的。本品含有对内源性碱性磷酸酶的阻断成分，可避免由内源性碱性磷酸酶造成的非特异性背景染色，适用于细胞涂片、冰冻***切片和石蜡包埋***切片。



产品说明本产品是基于鲁米诺底物的化学发光***盒，能够被辣根过氧化物酶（HRP）催化，发出强烈辉光，检测灵敏度达到 pg 级。本***盒优化了底物组成，使用了新型高0效增强剂，发光强度比传统 ECL 显色液提高了 30-100 倍，并有效地降低了背景。***盒使用新的氧化剂代替不稳定的HO，提高了***盒的稳定性，室温可稳定放置 1 年。工作液被 HRP 催化后，发出特定波长荧光（400-450nm），可对 X0光胶片***，也可直接使用荧光 CCD 扫描，主要应用于 Western 检测以及化学发光免0疫检测系统。

加生物素化抗0体

1. 去掉缓冲液，擦掉切片周围的液体。

2. 加生物素化抗0体，完全覆盖切片。

3. 室温孵育 30min。

4. 用洗涤液洗去抗0体，用洗涤液润洗 5min。

加亲合素-HRP

2. 加亲合素-HRP，完全覆盖切片。

4. 用洗涤缓冲液洗去亲合素-HRP，用洗涤缓冲液润洗 5min。

显色

1. 加显色液（自备）显色。

可能出现的问题和解决方法