QuickFreezing-M是一种具有自主知识产权、独0特配方的哺乳动物细胞冻存液，其化学组成明确，以DMEM等细胞培养基为母液，含有DMSO，不含血0清或其他蛋白成分。具有高0效、低毒、无外源因子和易于使用等优点，推荐用于常规哺乳动物细胞的冷冻保存。

特点描述

1.  QuickFreezing-M化学组成明确，以DMEM为母液，含有DMSO，不含牛血0清或其他蛋白成分。

2.  QuickFreezing-M由于其独0特的细胞保护配方，在冻存过程中细胞可直接放入-70℃冰箱，无需繁琐的程序降温操作。

3.  QuickFreezing-M不含牛血0清或其他蛋白成分，因而不会引入造成细胞种子污染的外源因子，比如各种牛源病毒和支原体等。

BAMBANKER? Direct无需离心收集细胞

①不需冻存前预处理，操作简便

②不需稀释，直接使用

③无需分步降温，直接使用

④可快速、长期冻存细胞（-80℃或液氮）

⑤不含血0清

BAMBANKER? Direct冻存步骤VS常规冻存步骤

　　使用本产品无需经过离心等复杂步骤，只需往培养基内添加与培养液等量的BAMBANKER

Direct，再分装到冻存管，置于-80℃便可冻存细胞。

【低温冻存实验证明以下细胞保存完好】

●　P3U1（mouse myeloma cell

line，小树骨0髓瘤细胞系）、K562（human leukemia cell line，人白0血病细胞

系）、human gastric

epithelialcells（人胃上皮细胞）、human γδT cells（人γδT细胞）；

●　Daudi（human B cell

line，人B细胞系）、PC12（rat-0derived adrenal pheochromocytoma，大鼠源shen上腺嗜铬细胞瘤）、human Bcell line（人B细胞系）；

●　OKT4（mouse hybridoma，小鼠杂交瘤细胞）、monkey B cellline（猴B细胞系）、Activated lymphocyte derived from human peripheral

blood（人外周血活化淋巴细胞）、Activated lymphocyte derived from mousespleen（小鼠脾0脏活化淋巴细胞）。

细胞冻存步骤

1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。

2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。

3. 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中，1000rmp，5分钟离心收集培养细胞沉淀，彻0底弃去离心管中的上清液。

4. 加入适量的CELLS***ING?细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞，制成细胞混合液。

5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中，建议每管1ml或1.5ml。

6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中，可长期冷冻保存。

7. 如果想液氮中长期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天时间，方可移至液氮罐中保存。

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使用方法

1. 用37℃水浴解冻细胞冻存液，并上下振荡数次混匀。

备注：为了尽量减少污染，未使用完的细胞冻存液***好冻回-20℃，反复冻融不影响使用效果。有沉淀

属于正常情况，主要为DMEM高糖培养基中的脂类与盐类的析出。

2. 用细胞消化液将生长良好的细胞消化成单细胞，并用细胞计数器或血球计数板计数细胞浓度。

备注：悬浮细胞不需要消化但仍需要细胞计数，不易消化成单细胞的各种293细胞等***好使用含有EDTA

的胰酶进行消化。

3. 用低速离心沉淀细胞，弃去上清。

备注：通常2000~3000rpm离心5~10min即可。

4. 用适量细胞冻存液重悬细胞。

备注：细胞浓度可根据情况调整为1~5×106/ml，通常为3×106/ml左右。