磷酸钙在良好的转染条件下，可以在293T等细胞的转染达到较高的转染效率。但磷酸钙转染有一个突出的问题，非常不稳定，尤其受PH值的影响非常大，在实验中使用的每种***都必须小心校准，保证质量，因为甚至偏离***优条件十分之一个PH都可能导致磷酸钙转染的失败，经常即使***熟练的转染实验者也不能保证每次磷酸钙转染的成功，他们可能经常为莫名其妙的转染失败而沮丧。同时，他们还经常发现，往往小体积的转染比如6孔板以下的转染效果比较理想，可一换到大皿，经常转染效率下降很快。磷酸钙的先天缺陷往往是实验梗阻的主要原因。

公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、近300种病理级抗0体、近3000余种病毒蛋白及病毒抗0体，另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

北京博奥龙免0疫技术有限公司专0业从事新型生化***的研发和销售，公司理念是通过自主创新的品牌产品改变传统实验模式，使研究变得更轻松、更高0效。公司目前主要围绕抗0体制备、免0疫检测、细胞转染、病毒包装和细胞冻存等领域，健全自己的产品和服务。公司现有自主知识产权产品包括：QuickAntibody系列快速免0疫佐剂--用于快速制备小鼠单、多抗；QuickShuttle系列转染***--用于快速细胞转染和病毒包装；

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

使用方法

1. 将新鲜消化的 BHK-21 细胞接种到 24 孔细胞板中，每孔 1~2×105细胞，1ml 完全培养基。备注：可在生长旺盛的细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染，无需 18~24 小时的等候时间。

2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染***分别稀释到 50μl 生理盐水中。备注：质粒 DNA 和转染***的***适用量需要根据不同培养基来优化，但理论上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范围。

3. 合并上述两溶液并混匀。备注：无需其它转染***所需的 10~30 分钟的等候时间。

4. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中，用加样器吸打混匀。备注：转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。

5. 将细胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注：无需在转染后 4~6 小时补加血0清或更换培养基。

6. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。

博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

重要提示

1. 与常规转染***不同，使用 QuickShuttle 可在贴壁细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染（立传立转），从而可节省 18~24 小时的转染前细胞培养时间。

2. QuickShuttle 极大简化了转染操作，转染***和质粒混合后无需室温静置孵育，可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染，而且无需在转染后补加血0清或更换培养基，整个转染操作可在一分钟内完成。

3. 立传立转、一分钟完成转染操作和高转染效率等优点使得部分使用 QuickShuttle 的转染实验可在细胞传代后 24 小时内完成，从而比常规转染***节约 24~48 小时。