HRP-山羊抗小鼠IgG2a即时留言「博特龙」
作者:博特龙2022/4/13 22:05:03







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博奥龙公司主要产品有抗0体制0备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。





Western Blot-抗0体检测技术服务?

一、服务内容

1、从动物细胞、人或动物***、***、植物等样品中提取蛋白,重组蛋白、血0清、培养上清等样品

2、对样品中蛋白进行半定量分析

3、Western blot检测

(1) 电泳:聚丙0烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品

(2) 湿法转印(BLOTING:Tank Transfer)

(3) 杂交:用抗0体鉴定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody)

(4) 化学发光检测(ECL),胶片***,TotalLab Quant软件读取IOD值(可选)










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1.选择部分样品进行预实验,参考目的蛋白一抗说明书进行3个稀释度的预实验

2.向客户反馈预实验结果,等待客户确认预实验结果后确定是否进行正式实验

3.请您提供质量0保证的一抗(或委托我公司代购)。抗0体的使用量通过预实验后进行确认,一般不回收使用一抗

4.如果需要对膜上目的蛋白进行抗0体剥离(洗脱或者 stripping)的,请提前说明








Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。同时Actin在细胞分泌、吞噬、locomotion、cytopla***ic streaming和cytokinesis等过程中起重要作用。Actin在不同物种之间高度保守,以至于很难获得较好的针对actin的抗血0清。Actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉***特异性的,包括α-skeletal muscle actin,α-cardiac muscle actin,α-***ooth muscle actin,和γ-***ooth muscle actin; 其余两种广泛分布于各种***中,包括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同的actin之间同源性大于90%,但在N-terminal同源性仅50%-60%,因此N-terminal常被用作actin的抗原。

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注:

抗原***以前需要收集一些正常血0清,已备检测抗0体时作为阴性对照。待兔子在新环境中稳定,大概需要四天左右时间,可以进行耳动脉取血。取血量约5ml足矣。

免0疫用的抗原必须纯化,否则影响抗0体的质量。抗原经FCA或FIA充分乳化后才能***。将抗原液与佐剂等比例混合后,置于混合器上使之剧烈振荡使抗原充分乳化,乳化过程比较费时、费力,但若乳化不充分,会影响免0疫的效果,振荡后,1000rpm离心一分钟,如水相和油相不分层即可***。首0次免0疫用FCA,以后都用FIA。

免0疫方法可采用背部多点***法。即于家兔脊柱两旁选4-6点皮下0***,每点注0.1ml,间隔2周后再于上述部位选不同点***(不要选择临近位点,否则***愈合不好)。每次免0疫的抗原量约100μg。免0疫次数在四五次即可,抗原用量大可以减少次数。



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