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服务项目说明

客户要求加可***marker的，需事先说明，并按照可***项目收费

1、提供的蛋白量与目的待检测的蛋白数量有关，蛋白数量增加相应的样品量也要增加

2、胞浆、胞核蛋白抽提样品来源为：哺乳动物细胞、动物***。如果1个样品分别提取胞浆、胞核蛋白后，蛋白定量时以2个样品计算

3、每张膜样品数量为1-8个，不足8个以8个收取。9-16个样品为2张膜，17-24个样品为3张膜；以此类推

举例：7个样品，1个目的蛋白，算1张膜；有9个样品，1个目的蛋白，算2张膜

     7个样品，2个目的蛋白，算2张膜，有9个样品，2个目的蛋白，算4张膜

以上为一般算法。如果客户样品数量需要按照组别等来进行上样时需要重新确定每张膜的上样量及膜的张数

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

实验步骤：

1 、首先将ELISA***盒***室温（大约30分），然后用纯水把清洗液配成工作浓度（1份浓缩清洗液加19份纯水）。

2 、取出酶标板。每个标本需要6孔，阳性对照6孔，阴性对照6孔。多余的用自封袋保存，记得放入干燥剂。

3 、将标本检测孔每孔先加入标本稀释液各50μl。然后将50μl 细胞培养上清（或特异亲和纯化的抗0体）再加入酶标微孔板，每个标本加6孔；阳性对照和阴性对照孔不加标本稀释液也是各加6孔每孔100μl。贴上封板膜37℃温育30分钟。

1、弃去板内液体，洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。再在每个标本的6孔中分别加入6种酶标二抗各100μl，通用阳性、阴性对照的各孔也一样。在加样图上或酶标板上做好标记。贴上封板膜37℃温育30分钟。

2 、吸弃板内液体，洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。每孔分别加入显色剂 A 和显色剂 B 各50μl，换一张新的封板膜贴板避光37℃显色20分钟。

3 、ELISA***盒特异性好一般肉眼即可观察出结果，看显色蓝的那个孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类。更可将反应终止液（每孔50μl）终止反应后用酶0标仪450nm 测长，630nm 参考波长双波长测定结果，参看高值孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类(阳性对照 OD 一般不小于0.8，阴性对照一般不高于0.15，阳性判定标准：样品 OD 大于阴性 OD+0.15，阴性 OD 低于0.05按0.05算)。

博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

什么是单克0隆抗0体？

单克0隆抗0体(MAb)，是针专一的抗原决定簇产生的抗0体，单克0隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年，由G.K?hler和Milstein创立。主要原理是利用产生抗0体的B细胞与肿0瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞，生产抗0体。

单克0隆抗0体制备的原理是什么？

要制备单克0隆抗0体需先获得能合成专一性抗0体的单克0隆B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨0髓瘤细胞可在体外生长繁殖，应用细胞杂交技术使骨0髓瘤细胞与免0疫的淋巴细胞二者合二为一，得到杂0种的骨0髓瘤细胞。这种杂0种细胞继承两种亲代细胞的特性，它既具有B淋巴细胞合成专一抗0体的特性，也有骨0髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性，用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克0隆抗0体。