哺乳动物的转染技术在60年代末70年代初即已引入。
将外源DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类,即生物方法和物理化学方法。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、显微***、电穿孔、脂质体介导的转染,以及***近出现的以高分子聚合物为载体的***传递技术。生物方法则主要是以病毒作为载体,通过病毒感0染的方式将外源DNA 导入到细胞中, 其中以逆转录病毒及腺病毒转染系统***为常用。
转染***简介:
其中病毒载体的特点是整和效0率高, 可使外源***在宿主细胞中长期表达,缺点是存在潜在的安全***性。电穿孔法及显微***法的特点是转染率较高,缺点是需要昂贵的仪器,前者对细胞的损伤较大,后者在导入DNA 时需要一个细胞一个细胞地***,不适合大量细胞研究的需要。
人们一直在寻找更有效、毒性小同时对研究影响也小的转染***。由于脂质类转染***对细胞的毒性是由其脂质特性决定的,众多的研究者和生物公司将新一代转染***的开发聚焦在非脂质体的聚合物上,并已有一些优0秀的***产品上市。
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