非共振原子荧光
当激发原子的辐射波长与受激原子发射的荧光波长不相同时,产生非共振原子荧光。非共振原子荧光包括直跃线荧光、阶跃线荧光与反斯托克斯荧光,直跃线荧光是激发态原子直接跃迁到高于基态的亚稳态时所发射的荧光,如Pb405.78nm。只有基态是多重态时,才能产生直跃线荧光。阶跃线荧光是激发态原子先以非辐射形式去活化方式回到较低的激发态,再以辐射形式去活化回到基态而发射的荧光;或者是原子受辐射激发到中间能态,再经热激发到高能态,然后通过辐射方式去活化回到低能态而发射的荧光。前一种阶跃线荧光称为正常阶跃线荧光,如Na589.6nm,后一种阶跃线荧光称为热助阶跃线荧光,如Bi293.8nm。反斯托克斯荧光是发射的荧光波长比激发辐射的波长短,如In 410.18nm。
荧光分光光度计与原子荧光光度计的比较
荧光分光光度计与原子荧光光度计名称中都 含有 “荧光”,那么什么是荧光。荧光是物质吸收光照或者其他电磁辐射后发出的光。大多数情况下,发光波长比吸收波长较长,能量更低。更为 简单的说法是,来自于短波长在光照条件下保存 的能量,将较长波长的光释放出来的过程,我们可以理解为荧光。斯托克斯早在十九世纪中期考 察荧光在奎宁和叶绿素的存在过程时就发现了发 射波长和入射波长的差异。通过研究证实,此现象应当是物质借助光照吸收了光能,再次释放出 来的光,并且这种光的波长是不同,这并不是在 光的漫射条件下引起的。由此,斯托克斯定义了荧光是光发射的这一重要概念。荧光分光光度计就原理来说,紫外光和蓝紫光通过高压***灯或是氙灯发出来后,借助滤光片对样品池进行照射,这时样品池当中的荧光物开始受到激发从而释放 出荧光,经过特定接受汇聚光路后,光电倍增管 接受荧光,并可以显示出来图或数字。详细体现 为: 物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态 的物质分子吸收激发光后变为激发态,这些分子是在一个不稳定的激发状态中,有部分能量在其 重返基态的过程中会以光的形式激发出,由此产 生了荧光。每一种物质都有和自身对应的分 子结构,具备激发态能级的分布也各有各的特征。
原子荧光光度计常见干扰
原子荧光光度计是利用KHB或NaHB作为检测还原剂,将待测溶液中的待测元素还原成原子蒸汽,并借助外力形成基态原子,在吸收
能量之后形成激发态原子,激发态原子在跃迁时将能量以荧光的形式散失,通过不同元素,荧光强度不同来判定待测液中的元素种类。其中KHB或NaHB的反应必须在酸性介质环境中进行,当环境酸度值降低时,空白对照组的荧光强度会偏高并波动幅度较大,在检测待测液中是否含有某种元素时,荧光强度有较大振幅,一般在1000—8000,因此导致原子荧光光度计在检测中结果差距较大,甚至由于荧光强度的较大振幅使得测量仪显示信号溢出。识别并排除介质干扰原子荧光光度计度的方法:通过观察试验检测现象,当出现原子荧光强度随着介质酸度值增加而增加,随着介质酸度值降低而下降的情况,就可以判定仪器故障是由介质因素影响的,可以通过更替的酸性介质来排除介质影响;再有,选择的原子荧光光度计酸性介质,以减小介质对荧光强度的影响;另外,在荧光强度检测的一系列过程中,都使用的酸性介质,从而保证荧光强度检测的性。
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