定居因子(Colonizationfactor,CF)

定居因子(Colonizationfactor,CF)：也称粘附素(Adhesin)，即大肠的菌毛。致病大肠须先粘附于宿主肠壁，以免被肠蠕动和肠分泌液清除。使人类致泻的定居因子为CFAⅠ、CTAⅡ(ColonizationfactorantigenⅠ、Ⅱ)，定居因子具有较强的原性，能刺激机体产生特异性。大肠具有很多毒力因子，包括内，荚膜，〣型分泌系统，黏附素和外等。(〣型分泌系统是指能向真核内输送毒性***产物的***效应系统。约由20余种蛋白质组成。)黏附素能使***紧密黏着在泌和肠道的细胞上，避免因排尿时尿液的冲刷和肠道的蠕动作用而被排除。大肠黏附素的特点是具有高特异性。包括：定植因子抗原〡，〢，〣;集聚黏附菌毛〡和〣;束形成菌毛;紧密黏附素;P菌毛;侵袭质粒抗原蛋白和Dr菌毛等。

用灭菌吸管吸取待检样液

用灭菌吸管吸取待检样液1.0mL，加入无菌平内。每个样品接种三个连续稀释度，每个稀释度接种两个平皿。于每个加样平内倾注15mL45~50℃的Aiiz-gal琼脂，迅速轻轻转动平，使混合均匀。待琼脂深固后，再倾注3mL-5mL Aliz-sal琼脂覆盖表面。同时将Aliz-gal琼脂倾人加有1mL上述无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的无菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后，翻转平板，干37+1℃培养箱培养18h-24h。取出平板，计数紫色(或红色)菌落。

培养基检验原理:胰酪胨提供碳氮源、***和矿物质满足***生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氡二钾是培养基pH缓冲剂:月桂基***钠可***革兰氏阳性菌的生长;大肠菌群可产生-半乳糖苷酶，分解液体培养基中的酶底物茜素-B-D-半乳糖苷(Aliz-gal)，使素游离并与固体培养基中的铝、钟、铁、钱离子结合形成坚备(或红色)的罄合物，使菌落呈现相应的颜色。

量取50

量取50.0ml混匀后的水样于硼硅酸盐玻璃或聚四氟乙烯烧杯中，如果水样有机质含量低，加入5ml，盖上表面皿，于电热板上95±5℃加热蒸发至剩余5ml，取下冷却，加入3ml，盖上表面皿，继续加热蒸发至近干，如有需要继续补加，直至消解完全（消解液颜色清亮或外观不再发生变化），冷却；如果水样有机质含量高，继续加入3mlH2O2溶液，盖上表面皿，加热并保持温度95±5℃，直至不再有大量气泡产生，冷却，继续加入H2O2溶液，每次1ml，盖上表面皿，加热并保持温度95±5℃，直至只有细微气泡产生或外观不再发生变化，继续蒸发至近干，冷却。