细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、***修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36 KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异性结合。以融合蛋白Annexin Ⅴ-EGFP作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。
3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合实验实验步骤:
1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中,并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液(如Tris或者甘氨酸),可以通过在PBS中透析或浓缩的方法除去。计算:蛋白质量(mg)/蛋白分子量(MW)=蛋白质的毫摩尔数。
2. 在打开之前,平衡生物素至室温。加2 mg Sulfo-NHS-Biotin于100 ul 超纯水中,加入足够量浓度的生物素,一般对于10 mg/ml 蛋白来说超过12倍分子数,对于2 mg/ml 蛋白溶液应超过20倍,或者该***也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中
3. 室温30分钟,或冰上放置2小时。
4. 用30 ml PBS预洗纯化柱,上样,加入与欲收集量相同的缓冲液,收集0.5 ml 或1 ml 于单独的管中。
化学***的分类依据是纯度及杂质含量,而***瓶的选择标准要看所
化学***的分类依据是纯度及杂质含量,而***瓶的选择标准要看所盛放***的特性而定,如塑料***瓶主要盛放一些对玻璃有腐蚀作用的***,棕色***瓶一般盛放一些受热易分解,需要避光保存的***等。搞清楚***属性,选择合适的容器才能保证***得到良好的贮存。实验纯(LR,黄标签):主成分含量高,纯度较差,杂质含量不做选择,只适用于一般化学实验和合成制备。
空气中的氧易使还原性***氧化而***
空气中的氧易使还原性***氧化而***。强碱性***易吸收二氧化碳而变成碳酸盐,水分可以使某些***潮解、结块;纤维、灰尘能使某些***还原、变色等。***变质的速度与温度有关。夏季高温会加快不稳定***的分解;冬季严寒则促使甲醛聚合而沉淀变质。日光中的紫外线能加速某些***的化学反应而使其变质(例如银盐、盐、和碘的钾、钠、铵盐和某些酚类***)。
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