蛋白质结晶原理

蛋白质的X射线结构分析首先要获得合适的单晶。蛋白质结晶学尚未发展成熟，尽管很受人亲睐，特别是受航天飞机中微重力实验 的激发。蛋白质结晶是一个反复试验的过程，蛋白质逐渐会从溶液中析出，杂质、晶核及其他未知因素对此过程有所影响。通常，蛋白质越纯，生长晶体几率越大。蛋白质结晶学者对蛋白质的纯度要求要严于生化学家的要求，后者往往在酶催化活性足够高时就很满意。另一方面，为了使蛋白质结晶，不仅要加其他成分，所有蛋白质分子的表面性质也必须是相同的，特别是表面的电荷分布，因为它影响晶体内分子的聚集。质谱是蛋白质结晶中的一种有效工具，例如检测重组蛋白的表达、样品纯度、重原子衍生物及蛋白质结构的特性。

普通蛋白结晶板

在普通24孔板的基础上发展出来用于结晶学研究。透明的PS材料，平整无变形的底提供了优异的光学性能。孔缘突出于板面，减少孔间污染的风险。在“沉滴”（Sitting Drop）中，需要用到“微桥”（Micro-Bridges）,结晶过程中或之后，“微桥”可以转移到另外一个孔。可用VIEWseal?（676070）密封，也可以用盖玻片通过硅油密封每一孔。

用于油下结晶（Microbatch）,梯形的孔形可将样品溶液集中于孔*，平的底部可在显微镜下观察结晶的生长。

蛋白结晶板过程

概括了蛋白质结晶的基本过程,阐述了蛋白质结晶的早期发展历程,***介绍了蛋白质结晶的近期研究状况,主要包括:形核机理的研究,结晶条件的筛选和结晶技术的优化以及基于结构的设计技术.特别是对离子液体在蛋白质结晶过程中的应用及发展前景进行了讨论，

论述了国内外生物大分子(蛋白质,酶等)沉淀结晶的研究现状和进展,着重从结晶热力学,粒子聚集,结晶的成核与晶体生长,以及场的作用等方面阐述了蛋白质沉淀结晶过程的特定现象与可能的结晶机理,对蛋白质的沉淀结晶过程作了的描述,并提出未来研究方向,为蛋白质结构分析,新药设计,生化研究以及工业化生产提供一定的基础。

蛋白结晶板

尽管近些年来在蛋白质结晶的理论、方法和技术上已取得巨大发展,获得衍射良好的蛋白质晶体仍然是利用X-射线解析蛋白质结构的一个主要瓶颈问题。这里我们发展了一种新型的蛋白质结晶方法—固液界面方法,即SLIM。该方法主要包括两个部分1)预先加入并干燥蛋白质母液;2)进行晶体生长的时候,直接将蛋白质溶液加入'干母液'中,从而产生一个固体(干母液)和液体(蛋白质溶液)的界面。该方法不仅操作简单、快速,而且降低了对蛋白质溶液浓度的要求。