蛋白质结晶涉及四个重要步骤

1. 蛋白质纯度的确定。如果不够非常纯，必须要进一步纯化。

2. 蛋白质溶解于合适的溶剂中，从中它能通过一种盐或有机化合物而析出。溶剂通常是水-缓冲剂溶液，有时加，如2--2，4-（MPD）。正常情况下，沉淀剂也被加入，但是浓度不高于使沉淀产生。对于不溶于水-缓冲剂或水-的膜蛋白，还需要加入去污剂。

3. 使溶液过饱和。在这一步中，小聚集体形成，它是晶体生长所需的核。对小分子的结晶来说，相比于蛋白质更为人熟知，晶核的自发形成需要提供表面张力能。一旦这个能障被突破了，晶体开始生长。能障在高水平的过饱和度时很容易克服。因此，在高过饱和度时，晶核更易自发形成。晶核的形成可作为一个过饱和度和其他参数的函数通过多种方法来研究，包括光散射、荧光去极化及电子显微镜。

4. 一旦晶核形成，晶体生长正式开始。对低分子量的化合物而言，新分子会逐步结合到正在生长的晶体表面。这是由于这些位置的结合能比较大，相对于分子结合到平滑的表面。这些步骤要么由晶系缺陷造成，要么发生在表面随机形成的晶核。

蛋白结晶板方法

本发明涉及一种蛋白质结晶板,包括结晶板主体部分,以及在结晶板主体上以阵列形式分布的储槽单元,每一所述储槽单元具有一面板,在所述一面板中间位置形成一凹槽,所述凹槽底部为第二面板，在所述第二面板中间位置或靠近一侧的位置凹入形成一储槽,所述一储槽至少一侧的第二面形成有至少一个滴液槽,所述一面板与第二面板通过连接部连接,所述结晶板主体部分在其四周具有支撑部.本发明还涉及一种利用上述结晶板进行蛋白质结晶的方法。

蛋白质晶体板介绍

研究蛋白质晶体结构的物理化学分支学科。蛋白质分子是由上百或更多的α-氨基酸作为单体缩合而成的多肽（见肽）链构成的。能构成蛋白质中多肽链的α-氨基酸总共有 20种L－氨基酸。通过它们不同的组合和排列形成氨基酸顺序不同的多肽链，然后这些多肽链进一步通过交联构成千万种蛋白质分子。多肽链的氨基酸顺序及其交联的位置代表蛋白质分子的一级结构。在一级结构的基础上，蛋白质分子中的多肽链按一定的方式在空间分布，形成二级和三级立体结构等。－氨基酸、 多肽链和二硫桥蛋白质分子是一个由α-氨基酸单体相互缩合而成的多肽分子。其中每个氨基酸缩合后残留的部分称为氨基酸残基。

蛋白质晶体板

半胱氨酸、赖氨酸的蛋白质、以及含有金属离子的蛋白质。这些蛋白质的吸附会导致重组蛋白质纯度大幅降低。为了解决这一问题,我们制备了两类新材料,用于提高重组蛋白质纯度:1)通过分子印迹技术,以组氨酸标签为模板,在IMAC材料表面形成组氨酸标签的分子印迹层,使得不含组氨酸标签的蛋白质无法靠近IMAC材料,从而提高重组蛋白纯度;2)通过活性可控自由基聚合,在IMAC基质材料表面包被了一层尺寸可控的聚合物涂层。在聚合物网络的筛分作用下,进而实现带组氨酸标签的重组蛋白的纯化。