蛋白质结晶原理

蛋白质的X射线结构分析首先要获得合适的单晶。蛋白质结晶学尚未发展成熟，尽管很受人亲睐，特别是受航天飞机中微重力实验 的激发。蛋白质结晶是一个反复试验的过程，蛋白质逐渐会从溶液中析出，杂质、晶核及其他未知因素对此过程有所影响。通常，蛋白质越纯，生长晶体几率越大。蛋白质结晶学者对蛋白质的纯度要求要严于生化学家的要求，后者往往在酶催化活性足够高时就很满意。另一方面，为了使蛋白质结晶，不仅要加其他成分，所有蛋白质分子的表面性质也必须是相同的，特别是表面的电荷分布，因为它影响晶体内分子的聚集。质谱是蛋白质结晶中的一种有效工具，例如检测重组蛋白的表达、样品纯度、重原子衍生物及蛋白质结构的特性。

蛋白结晶板使用

蛋白质是水产品的主要组分,其含量测定在水产品加工及研究等方面应用极为广泛.目前,各蛋白含量快速测定方法通常是在试管中进行反应并应用分光光度计测定,其操作过程较繁琐,分析大批量样品时效率低,上述缺点在高通量筛选、检测等场合尤为突出.为了克服该不足,实现蛋白含量的快速高通量测定,本研究基于Folin-酚法,利用96孔板作为反应器并配合比色,建立了一种蛋白含量测定的微孔板方法并评价其合理性.该法测得样品的蛋白含量与常规法结果无显著性差异,反应在30-90 min显色稳定,标准曲线的线性相关系数R2=0.9922,标准偏差范围为0.07%-0.78%,检测限为10 μg.与常规法相比,微孔板法保持了Folin-酚法的准确性及稳定性,同时具有通量高、节省样品、***及测定时间等优点,在蛋白高通量快速测定方面更具优势。

温度控制作为调控蛋白质结晶过程的手段,在结晶实验中被广泛采用.热历史 效应作为蛋白质结晶实验中新的影响因素,已被越来越多的科学家所重视.控制温度可以改变蛋白质的溶解度,进一步改变溶液的过饱和度,从而影响结晶过程.我 们简要总结了温度对蛋白质结晶的影响及应用温度技术控制蛋白质晶体生长的各种技术,为蛋白质结晶工作提供理论和实验依据。

从溶液中聚集体的角度研究了溶液的热历史改变生长出的蛋白质晶体的数目和尺寸的内在原因.将在281和309 K下保存1 d的两组溶菌酶溶液按不同比例混合,加入沉淀剂生长晶体.随着高温溶液的比例增加。