细胞周期蛋白A1***orb101828 PubMed 28043364 生殖学
半胱胺通过减少孕酮和生长因子的产生***围青春期绵羊乳0腺发育。
细胞周期蛋白D1***orb10496 PubMed 25266804肿0瘤生物学。
Rho相关蛋白激酶1的敲除***胶质瘤细胞的增殖和侵袭。
CYP27B1***orb39746 PubMed 27529229国际分子科学杂志
25(OH)D通过将25(OH)D转化为1α,25(OH)D有效***人胆管0***细胞生长?D?.
条带中间出现白斑点
1. 原因:底物消耗过快,中间区底物消耗完不发光了;
2. 优化:降低蛋白量,降低一抗和二抗的浓度;
3. 解析:快速操作,在中间部位底物消耗之前就把胶光片定影出来,一般实验员很难把控制;首0选从降低蛋白量,降低一抗二抗浓度入手。
出现黑点
1. 原因:膜上其他部位与一抗或者二抗非特异性结合;
2. 优化:封闭用的牛奶一定要纯并且完全溶解,封闭后至少洗膜一次;
3. 解析:确定封闭牛奶完全溶解,否则封闭时会导致不溶性颗粒附着在膜上,在发光时膜上会出现黑点;建议在牛奶溶解之后静止三分钟,轻取上层牛奶液进行封闭,封闭结束常规洗膜一次;孵育一抗或二抗时,需要加牛奶的也请参照此操作。
条带拖尾
1. 原因:蛋白量太大,一抗浓度偏高和孵育时间太长;
2. 优化:根据实验需求调整上样蛋白量,调整一抗浓度和时间;
3. 解析:这种情况也是常见问题,上样蛋白量一般会做预实验避免;还有容易发生的是一抗浓度太高,作用时间太长引起的,品牌一抗都有稀释比例建议;再个质量好的一抗直接37度孵育半小时就好,无需孵育过夜;再强调一遍洗膜千万不要偷懒,次数和时间洗到位,不要担心把***和蛋白洗掉没那么脆弱。
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