如何选择适合您实验需要的抗0体
一抗选择
(1)确定抗0体的名字,注意中英文名字、别名、亚型等信息。
(2)确定您的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,或者是FACS。biorbyt的每种抗0体说明书都会列出抗0体经验证过适用的实验类型,如果抗0体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗0体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种实验验证。
抗0体反应的因素:
1.电解质 :抗原抗0体特异结合后,胶体粒便可发生脱水作用,此时易受电解质影响,如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚,于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应***适温度。
DIGE based proteome analysis of mammary gland tissue in water buffalo (Bubalus bubalis): lactating vis-a-vis heifer.
ANO5 antibody orb39268 PubMed 25094048 Biochem Biophys Res Commun
抗0体的特异性鉴定:抗0体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗0体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争***试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争***曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
APOBEC3B antibody orb155694 PubMed 27818121 Experimental and molecular pathology
回收后重复使用的抗0体,使用方法同新鲜稀释的抗0体。如果在重复使用过程中发现抗0体出现轻微混浊现象,可以10,000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗0体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗0体。
提供的Western一抗稀释液也可以用于免0疫荧光(IF)、免0疫组化(IHC)、免0疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得***佳的检测效果,请考虑使用上述检测专0用的一抗稀释液。
本产品仅0限于专0业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治0疗,不得用于食品或***,不得存放于普通住宅内。
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