在选择你的试剂盒之前，需确保它与你的靶标和样品的相兼容性。即理想情况下，您选择的试剂盒可以完全应用于您正在测试的样品（即血浆，尿液，组织培养，唾液等）。其次检查试剂盒检测范围和试剂盒的灵敏度是否合适，保证该试剂盒能够检测到你正在验证的物种中的靶标。

每个试剂盒都是为了检测特定目标而研发的，并且具有特异性，但它不是“一刀切”。所以提前了解您ELISA试剂盒的灵敏度和特异性，以及如何准确地进行每个步骤，如何产生一个准确和可靠的标准曲线，显示您目标靶标的量化是很重要的。每个试剂盒都含有目标特异性试剂和缓冲液，您需要在开始实验前了解并理解每组参数，例如抗体类型，孵育时间，温度和报告系统。提前熟悉这些因素将节省您大量时间和避免失败重复的挫折感。

elisa实验中，恰当的洗涤步骤对于减少由于未结合的偶联抗体引起的背景信号是必要的，所以正确的洗涤步骤有助于增加分析的信噪比和保证单一特异性结合。

确保洗涤液体积足够多，以除去孔中游离的抗原或抗体的痕迹，从而减少不需要的背景信号。

保持孔底和洗涤端之间的建议距离，以减少残留的抗体/抗原液体，从而影响信号。浮动头更灵活，更容易获得完整的清洗。重复循环洗涤以确保除去不需要的抗原和抗体，但已结合的抗体会保留在结合原位。

Biorbyt建议在每次孵育后进行三次洗涤。根据您所使用的板子是出厂包被还是您自己包被的，可以对洗涤方式进行调整，如果是您自己包被的板子，您可能需要增加清洗次数。

按照试剂盒制造商的建议，对试剂盒试剂进行恰当的保存，处理和移液操作至关重要。根据说明书和实验方案的推荐进行稀释剂，试剂和清洁剂的选择，并保持试剂盒使用的正确pH，温度和强度条件，检查小瓶/管试剂在（离心）旋转后充分溶解。每种测定方法不一定完全相同，但应该有可以接受的变化范围。应为每组样品制备标准曲线。在厂家建议的稀释范围内生成标准曲线，并确保您有足够的数据点。试图扩大延长标准曲线没有任何好处，因为抗体结合只能在一定范围内产生数据。