ELISA***盒在我们国内有许多种叫法,例如:ELISA检测***盒、ELISA Kit、酶联***盒、酶联吸附测定***盒、酶联分析***盒、酶免***盒等,比较常见的叫法是ELISA检测***盒、酶联吸附测定***盒等。
ELISA***盒自从60-70年代问世以来,得到全世界科研工作者的认可及推崇。在欧美及中国获得很大的推广。
该***盒的原理是基于夹心酶联immune-sorbent测定技术。 捕获***预包被到 96 孔板上。 并以生物素偶联***作为检测***。
随后将标准品、测试样品和生物素偶联检测***加入孔中,并且用洗涤缓冲液洗涤。 加入 HRP-链霉亲和素,用洗涤缓冲液。 TMB 底物用于观察 HRP 酶促反应。 HRP 催化 TMB产生蓝色产物,加入酸性终止液后变为***。 ***密度与板中捕获的目标样品量成正比。 阅读microplate reader O.D. 450nm 处的吸光度,然后可以计算目标的浓度。
如果您在结果中注意到“钩状效应”,可能的原因是分析物不足以与样品中抗原的量结合。这个问题也可以通过首先在一系列稀释度下进行预实验测试来解决。如果您发现结果灵敏度较低,则需要检查:
- ***盒保存是否正确
- 检测***是否充分发挥作用
- 您的样品类型和缓冲液是否兼容
- 靶蛋白和底物浓度/数量是否是足够的
- 读板器的吸附波长设置是否正确
- 记录时间是否足够长
- 您的ELISA***盒对您的测定是否具有正确的灵敏度。
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