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作者:英国biorbyt中国办事处2021/11/13 2:42:38
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视频作者:武汉博欧特生物科技有限公司







ENU突变衍生的小鼠模型,具有类似系统性自身免0疫***表型的显性Jak1突变。.

IL7受体α(磷酸-Tyr449)抗0体orb6212 PubMed  23791841美国病理学杂志

疲劳刺激骨骼肌引起大鼠多个器0官热休0克蛋白激0活:肌肉***支配的作用。

IGF1R(磷酸-Tyr1165/Tyr1166)抗0体orb5500 PubMed  23791841美国病理学杂志


空白片

1. 原因:比较多,***可能是一抗加错了,或者稀释时没取到亦或原管***没有混匀,再有可能二抗种属加错了,例如常见是兔的加成鼠的;转膜电压电流时间等;

2. 优化:仔细检查***是否加错,核实转膜设置没有问题;

3. 解析:胶片上一点信号都没有,多数情况是***加错了;如果中间出现了微弱的条带,可能原因是蛋白上样量太少,一抗浓度过低,ECL发光液稀释过高或失效。若转膜出现了失误,比如膜放反了,肯定白片。




条带中间出现白斑点

1. 原因:底物消耗过快,中间区底物消耗完不发光了;

2. 优化:降低蛋白量,降低一抗和二抗的浓度;

3. 解析:快速操作,在中间部位底物消耗之前就把胶光片定影出来,一般实验员很难把控制;首0选从降低蛋白量,降低一抗二抗浓度入手。


出现黑点

1. 原因:膜上其他部位与一抗或者二抗非特异性结合;

2. 优化:封闭用的牛奶一定要纯并且完全溶解,封闭后至少洗膜一次;

3. 解析:确定封闭牛奶完全溶解,否则封闭时会导致不溶性颗粒附着在膜上,在发光时膜上会出现黑点;建议在牛奶溶解之后静止三分钟,轻取上层牛奶液进行封闭,封闭结束常规洗膜一次;孵育一抗或二抗时,需要加牛奶的也请参照此操作。





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