先前研究表明,用作供体底物的酮糖可以被酮酸羟基酸(HPA) 取代,通过释放二氧化碳使反应不可逆。因此,TK似乎是一种强大的酶,用于不对称合成α-羟基酮(方案)。当HPA作为供体时,TK对非磷酸化短碳链α-羟基醛(C–C)表现出活性。此外,TK优先接受(R)-羟基醛,产生 (S, R)α-羟基酮。发现并表征了来自嗜热脂肪地芽孢 (TKgst)的个热稳定TK,在高温下表现出高稳定性和对异常反应条件的稳健性。使用合理的诱变方法将羟基化或非羟基化醛作为受体 (,) 和脂肪族 α-酮酸作为供体,提高和扩大了 TKgst 底物特异性及其对映体偏好,确认了工程化的TKgst,其能够促进了脂肪族受体和供体底物组合的脂肪族α-羟基酮 (C-C) 的合成。
与Gly相比,代替His的非极性Ala或Val残基(HLHALI 和 HLHVLI)具有较低的活性,因为它们具有较高的空间位阻,这阻碍了的非极性头部与 HL 的相互作用。与 Gly 相比,极性和或带电的Ser和Glu代替 H (HLHELI) 也导致较低的活性,这可以通过Ser的极性侧链和与D冲突的Glu的负电荷来解释,这种环境使的非极性头部朝向HL的位置不稳定。 规模制备具有脂肪族 α-羟基酮裂解活性的TKgst 突变体随后在乙醇醛存在下对和裂解反应进行了制备规模的研究。
为了证明这种方法在合成化学中的潜在应用,选择(+)-estrone作为目标进行合成放大。按照Corey以及List报道的路线,合成得到Torgov报道的,-二酮后,在优化条件下对其进行催化氢化定量得到羟基酮(ee ,?dr :),然后经Prins环化脱水和IBX氧化得到二烯u,再通过两步转化得到(+)-estrone。(图片来源:Chem. Sci.)对反应中只有一个羰基被还原的现象产生好奇。当用剧烈的条件时,也难以得到二醇(Scheme ,eq. )。
氯化亚铜和三氯化铁等无机阻聚剂也可用酸洗除去。常用阻聚剂的分类及机理如下。()多元酚类阻聚剂多元酚及取代酚是一类应用广泛、效果较好的阻聚剂,但必须在单体中溶解有氧时才显示阻聚效果。其阻聚机理是酚类被氧化成相应的醌与链的自由基结合而起阻聚作用。在酚类阻聚剂存在下,使过氧化自由基很快终止,确保在单体中有足够量氧,可以延长阻聚期。