先前研究表明,用作供体底物的酮糖可以被酮酸羟基酸(HPA) 取代,通过释放二氧化碳使反应不可逆。因此,TK似乎是一种强大的酶,用于不对称合成α-羟基酮(方案)。当HPA作为供体时,TK对非磷酸化短碳链α-羟基醛(C–C)表现出活性。此外,TK优先接受(R)-羟基醛,产生 (S, R)α-羟基酮。发现并表征了来自嗜热脂肪地芽孢 (TKgst)的个热稳定TK,在高温下表现出高稳定性和对异常反应条件的稳健性。使用合理的诱变方法将羟基化或非羟基化醛作为受体 (,) 和脂肪族 α-酮酸作为供体,提高和扩大了 TKgst 底物特异性及其对映体偏好,确认了工程化的TKgst,其能够促进了脂肪族受体和供体底物组合的脂肪族α-羟基酮 (C-C) 的合成。
目前,手性羟基酮的构建于酶催化的还原、Ru-催化的迁移氢化和不对称CBS还原(Scheme ),但上述方法均存在底物适用范围窄、选择性适中或催化剂负载量高的缺点。α,α-二取代,-环二酮的单还原的挑战在于如何通过一步实现对映选择性和非对映选择性以及防止过度还原为二醇。在迁移氢化过程中,不同的面进攻方式导致产生两对非对映异构体,并且对映选择性源于季碳与亚的区分(Fig. )。
研究认为,活性H来源于B-H键的解离,SSBC加速了H的提取。这与计时安培试验的结果一致[图(b)]。图?(a)反应速率常数Kapp与石墨N含量的关系;(b)反应速率常数Kapp与IDIG值的关系。图(a)显示出反应速率常数Kapp与石墨氮含量的关系,可以观察到石墨氮和Kapp含量之间的近正线性关系。还发现-还原的催化活性与石墨氮的含量之间存在较高的相关性。证明石墨氮在硝基芳烯中表现出的吸附能和长的N-O键,这可能是其比掺杂石墨烯中其他氮活性更高的原因。
图(d)显示了Kapp为-酚-酚-酚,-二酚,这归因于共轭、归纳和空间效应的共同效应。图?(a)SSBC-的循环性能;(b) (b) SSBC-在不同水环境中还原-酚的ln (CtC)随时间的变化曲线。图(a)显示了SSBC-的循环性能,在使用次后,SSBC-在min内仍可以还原的-酚,表明具有良好的循环性能。为了估计SSBC-在真实水生系统中的催化效率,尝试在自来水、湖水和河水在内等不同水样中还原-酚,结果如图(d)所示。