组成编辑完整的ELISA***盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或的固相载体(吸附剂);(2)酶标记的抗原或(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制(定量测定中);(5)结合物及标本的稀释液;(6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;(7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为***,其浓度按加量及比色液的终体积而异,在板式ELISA中一般采用3mol/L。
1、 :操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 ***匀浆:将***加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
酶标记: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 13 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 24 缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 15 标记稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 16 显色剂: TMB底物液 15mL x 17 终止液: 1N*** 12mL x 1
8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但***盒没有提供)